Inden man går ind i arbejds- og arbejdsprincipperne for Lateral flow assay det er vigtigt at give en kort introduktion om Lateral flow -analyse. Lateral Flow Assay eller for at blive kaldt ved et andet navn, dvs. De vigtigste aktører involveret i denne gruppe er antigen, antistofarter og prøven eller matricen. Også, Lateral flow -assays bruges til en række påvisnings- eller diagnostiske formål, såsom de bruges til påvisning af kræft ved kræftmarkør, graviditet, påvisning af stofmisbrug eller overdosering, patogener, infektionssygdomme og også til hjertemarkører.
Lateral Flow Assays arbejde er baseret på 4 facetter. Først og fremmest er det en enhed, der har en prøvepude, en konjugeret pude, en testlinje og en kontrollinje (nitrocellulosebånd). Hver del af denne udformede er adskilt af en lille afstand, der tillader en jævn strømning af prøven. Det første trin til at bruge denne enhed er, at prøven sættes på den enhed, der føres fuldt ud til den laterale strømningsanordning. Når det flyder, sker filtreringsprocessen, hvor de uønskede eller uønskede partikler neutraliseres eller filtreres. Inden for den givne varighed af Lateral flow assay -testafslutningen forekommer hele processen, og der kan således ses resultater. Når prøven når apparatets konjugerede pude, blandes de tørrede partikler på puden med partiklerne i prøven.
Det næste trin, der sker, er strømmen af analytbundne nanopartikler og adgang til kontrollinjerne, der yderligere fører til resultaterne. Prøven kan derefter begynde at flyde til den konjugerede pude, som indeholder stærkt farvede eller fluorescerende nanopartikler med et antistof på deres øverste lag. Der er også en transporterende pude, der fuldstændigt absorberer prøven eller prøvevæsken for at sikre, at der ikke er væske tilbage omkring test- og kontrollinjerne. Kontrollinjen i den laterale strømningsindretning, der er mærket som C, består af affinitetskirtler, der yderligere hjælper med at binde nanopartikelkonjugatet med eller uden tilstedeværelse af en analyt i opløsningen for at sikre, at assayet fungerer korrekt frem for ellers . Grundlæggende er metoden til testning af denne enhed baseret på aspekterne af antigen-antistofreaktion. Som det er nævnt ovenfor, kan de laterale flow-assay-tests give aflæsningen i to former enten kvalitativ eller semi-kvantitativ analyse.
Førte dem videre til den detaljerede forklaring, er det første trin i prøvepuden, som prøven flydes på og derefter absorberes. Der er en chance for, at filteret er på prøvepuden for at flyde den nøjagtige og nødvendige mængde af prøven. Den anden fase er på den konjugerede pude. Den konjugerede pude begynder at virke, efter at prøven er absorberet, og den har konjugerede mærker og antistoffer, der vil beregne, om analytterne er til stede i prøven eller ikke for bindingshændelserne. Efter disse to faser begynder arbejdet med nitrocellulosemembranen at fungere. På nitrocellulosemembranen vil analytterne eller antistofferne til stede i prøven og den konjugerede pude binde sammen med nitrocellulosepuden. Efter dette vil det gå videre til den absorberende pude, der hjælper med at absorbere en ekstra mængde prøve og producere resultaterne.
For at eksemplificere arbejdet med Lateral Flow Assay Testkan eksemplet på antistoffets hurtige testkit af Covid-19 tages. Når prøven eller prøven sættes til prøvepuden på den laterale strømningsanalyseindretning, passerer den yderligere gennem en film, der er til stede på enheden, kaldet filterfilm. Når det er blevet bestået, vil tilstedeværelsen eller fraværet af målanalytten blive testet, og hvis prøven vil have de ønskelige analytter, vil den fusionere med et antigen, der kaldes kolloidalt guldmærket antigen, som vil have et farvet bånd. Hvis der er et farvet bånd, betegner det tilstedeværelsen af målanalyser i prøven, der blev tilføjet til Lateral flow assay -testen til test og diagnostiske formål. Og hvis der ikke er en farvet linje, betyder det, at resultaterne er ugyldige. Sidst men ikke mindst er der en kontrollinje for Lateral flow -analyseanordningen, der viser, at der er tilføjet tilstrækkelig mængde af prøven til enheden.
For at forstå, hvordan et lateralt flowassay fungerer, er det også relevant at diskutere fortolkningen af resultaterne. Først og fremmest er det vigtigt at forstå de forskellige dele af enheden som f.eks konjugeret pude, prøvepudeosv. Så når de konjugerede antistoffer samles ved kontrollinjerne, begynder linjerne at blive vist for at vise resultaterne. De synlige linjer på guld -nanosfæremærker, der er de mest anvendte etiketter, er røde i farven og kræver ikke nogen udvikling. Dimensionerne af guld nanopartikler bestemme de forskellige nuancer af rødt, og styrken demonstreres af tærsklen for konjugerede antistoffer begrænset til de immobiliserede linjer. Hvis der vises en rød linje på testlinjen, angiver det, at resultatet er positivt. Når man taler om intensiteten, afhænger det af mængden af analyt til stede i matrixen af prøven. Kontrollinjens udseende på sidestrømsanalyseanordningen er også et must-have for at sikre, at der er givet tilstrækkelig mængde prøve, og mængden er ikke mindre til testning og afgivelse af nøjagtige resultater.
Arbejdet med Lateral flow -analyse er relativt lettere og forståeligt. Da de ikke er begrænset af laboratorierne, fungerer de snarere også uden for laboratoriet, og man kan let bruge dem og forstå forskellige dele. De bemærkelsesværdige egenskaber ved sidestrømsanalyseanordningen og guld nanopartikler, har gjort testen en lettere proces og også en tilgængelig. De spiller en enorm rolle i kliniske og diagnostiske formål.
Referencer
https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/lateral-flow-test
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics#target
