Dè bhios a ’toirt air antibodies fuireach air measaidh sruthadh lateral membrane Nitrocellulose?
Tha Membran Nitrocellulose anns an Deuchainn Sruthadh Taobhach a’ tighinn às dèidh an t-sampall agus am pada conjugáit. Canar membran fo-strat ri membran nitrocellulose cuideachd agus tha e mar aon de na pàirtean as cudromaiche agus as mothachaile a thaobh thoraidhean na deuchainn a chaidh a dhèanamh air an Deuchainn Sruthadh Taobhach . Anns an Deuchainn Sruthadh Taobhach, dh’ fhaodadh diofar stuthan a bhith gan cleachdadh leithid acetate ceallalose, polyvinylidene fluoride (PVDF), nylon atharraichte le cosgais, agus polyethersulfone (PES), msaa. Anns a’ membran Nitrocellulose, tha diofar mheudan pore, porosity, tiugh agus làimhseachadh ceimigeach ann . Chan eil sgaoileadh co-ionnan de phòran aig membranan nitrocellulose agus mar sin is fheàrr an ùine sruthadh capillary. Mus tèid thu nas fhaide a-steach don reusanachadh, tha e cudromach fios a bhith agad mun t-sruthadh capillary. Gu bunaiteach, tha ùine sruthadh capillary air a thomhas ann an diogan no ceudameatairean agus is e an ùine iomlan a thug e airson an sampall a bhith air a lìonadh gu tur anns an stiall deuchainn no an inneal Deuchainn Sruthadh Taobhach.
Bidh membran nitrocellulose ag obair mar bhuidheann giùlain airson na antibodies air an inneal assay sruthadh lateral. Bidh iad cuideachd air an cleachdadh airson sgrìonadh de dhiofar phròiseasan agus sheòrsaichean de antibodies ie monoclonals agus tha seo a ’tachairt mar thoradh air atharrachadh an enzymoimmounoassay.
Air a’ membran nitrocellulose , bidh na h-antasubstaintean a’ fuireach agus a’ ceangal ris na mìrean bith-eòlasach an dàrna cuid latex no mìrean òir. Chan eil cead aig na h-antasubstaintean gluasad agus tha iad neo-ghluasadach air a’ membran nitrocellulose air sgàth diofar adhbharan. Leis gu bheil loidhnichean deuchainn agus loidhnichean smachd air an deuchainn sruthadh taobhach, tha na h-antasubstaintean glaiste eadar an dà loidhne seo. A’ beachdachadh air an loidhne deuchainn, thathas ga cleachdadh gus ceangal ris a’ phròtain sampall ach tha na h-antasubstaintean sònraichte don ghnè aig an loidhne smachd a thathas a’ cleachdadh gus na h-antasubstaintean anns an sampall a lorg nas fhaide. Is e adhbhar eile a bhios na h-antasubstaintean a’ fuireach air a’ membran nitrocellulose meud nan pores anns an fhilm cùil. Chan eil am film cùil neo-phorach den membran nitrocellulose a’ leigeil leis na h-antasubstaintean sleamhnachadh dheth an àite sin tha iad air an làimhseachadh gu teann agus mar sin a’ fuireach air an membran. Bidh seo cuideachd a’ cuideachadh le bhith a’ lughdachadh caochlaideachd.
Is e factaran cudromach eile a bheir air na h-antasubstaidean fuireach air a’ membran nitrocellulose taghadh de lagaiche-antasubstaide, dòigh tiormachaidh, dùmhlachd nan antibodies glacaidh, agus an ìre aig a bheilear a’ toirt seachad ath-bhualadairean. Feumar tiormachadh ceart gus dèanamh cinnteach gu bheil na antibodies glacaidh ceangailte ris a’ membran; a dh’aindeoin sin, bheir e tòrr ùine airson membranan le cùl tiormachadh an taca ris na membranan gun chùl. A bharrachd air an iom-fhillteachd, draghan luchd-cleachdaidh, ullachadh shampall, cumail suas, ath-riochdachadh, agus mìneachadh thoraidhean furasta a chleachdadh, bu chòir dèanamh cinnteach an-còmhnaidh gu bheil lorg mothachail air paramadairean sònraichte. Tha cuid de na h-inbhean sin, leithid mìneachadh agus cugallachd thoraidhean, gu mòr mar thoradh air neo-ghluasadachd agus gleidheadh fànais riochdairean lorg le paramadairean na sgìre deuchainn.
Is e dòigh eile a tha cuideachail ann a bhith a ’toirt air antibodies fuireach air an membran nitrocellulose an ceangal covalent de na antibodies ri membran an Assay Flow Assay. Cuideachd, tha gluasad neo-sheasmhach nan antibodies air an membran nitrocellulose de LFA a ’toirt fa-near comas làidir nan memblan nitrocellulose ann a bhith a’ ceangal antibodies air. Mar a chaidh a ràdh roimhe seo anns an Assay Flow Assay tha mìrean ann a tha mothachail agus deatamach airson deuchainn an t-sampall. A ’ceangal seo ris na mìrean òir colloidal, tha iad air dearbhadh gu bheil na h-antigens a’ fuireach air an membran ceallalose. Anns a ’phròiseas seo, is e a’ chiad cheum a bhith a ’gabhail a-steach fulangach an antibody a dh’ fheumar air uachdar nanoparticle òr colloidal. Is e seo aon den fheadhainn as dùbhlanaiche anns an Lateral Flow Assay. Airson an adhbhair seo, chaidh na mìrean co-cheangail a chruthachadh a bheir air falbh gu furasta na antibodies, moileciuilean agus eileamaidean eile fuireach air an membran nitrocellulose.
Tha seo cuideachd a ’tabhann ceangal agus còmhdach furasta de na antibodies air an uachdar a’ toirt a-steach mion-sgrùdaidhean eile agus eadhon biomolecules. A bharrachd air an sin, tha na grìogagan latex anns an assay sruthadh lateral cuideachd feumail ann a bhith a ’toirt air antibodies fuireach air an membran nitrocellulose. Cuideachd, faodaidh co-fhulangas fulangach cuideachadh le bhith a ’toirt air antibodies fuireach air an membran nitrocelluse anns an deuchainn assay sruthadh lateral. Eadhon ged a dh ’fhaodadh na pròiseasan agus na h-adhbharan sin toirt air antibodies fuireach air an membran nitrocellulose den Lateral Flow Assay, tha iad a’ toirt ùine agus pròiseasan glè fhada Chan e a-mhàin seo, ach tha feum air uidheamachd mòr agus rudan eile cuideachd a tha ga dhèanamh hectic agus glè cosgail. Cuideachd, tha cuid de dh ’adhbharan a’ feumachdainn optimachadh gnìomhach a dhèanamh air a ’pH agus is e rud farsaing a tha seo, mar sin, chaidh dòighean-obrach agus pròiseasan ùra a thoirt a-steach don inneal Assay Flow Assay a tha a’ leantainn gu cleachdadh dhòighean eile. Tha càraid de antibodies air an gluasad gu sònraichte air nitrocellulose le bhith a ’gabhail a-steach corporra. Le freumhaichean domhainn ann an rannsachadh, faodaidh na antibodies fuireach air an membran nitrocellulose mar thoradh air an eadar-obrachadh hydrophobic agus dipolar sònraichte eadar an dà chuid de na raointean pròtain agus nitrocellulose, a tha a ’leantainn gu gleidheadh stiùireadh antibodies.
Co-dhùnadh
Gus crìoch a chur air agus geàrr-chunntas a dhèanamh air a’ chùis seo a rèir an tuairisgeul gu h-àrd, tha nitrocellulose na phàirt chudromach den deuchainn sruthadh taobhach agus an inneal a thathar a’ cleachdadh airson an deuchainn. Is e aon de na factaran as cudromaiche agus as riatanach a tha a’ dearbhadh an Deuchainn Sruthadh Taobhach agus a cugallachd am Membran Fo-strat no Membran Nitcocellulose . Tha na loidhnichean deuchainn is smachd air an tarraing thairis air a’ membran gus dèanamh cinnteach gu bheil na h-antibodies a’ ceangal agus a’ glacadh gu math. Faodaidh adsorption neo-shònraichte air na loidhnichean deuchainn is smachd buaidh a thoirt air cugallachd nan toraidhean, agus mar thoradh air sin bidh luachan toraidh meallta ann. Leis gur e nitrocellulose aon de na pàirtean den deuchainn sruthadh taobhach às a bheil an sampall air a thoirt seachad. Às an sampall, bidh na h-antibodies agus na pàirtean antigenach den dà chuid an sampall agus an inneal a’ tighinn còmhla ri chèile agus a’ dol air adhart chun ath phàirt. Às an sin, bidh an sampall a’ sruthadh chun membran nitrocellulose a bhios mar thoradh air sin a’ gabhail a-steach na antibodies agus na antigens a tha a dhìth airson an deuchainn. Chaidh na feartan agus na h-adhbharan a tha a’ toirt air antigen fuireach air a’ membran nitrocellulose a mhìneachadh gu mionaideach gu h-àrd agus mar sin a’ còmhdach cuspair a’ phàipeir.
iomraidhean
https://www.creative-diagnostics.com/Immunochromatography-guide.htm
https://fnkprddata.blob.core.windows.net/domestic/download/pdf/IBS_A_guide_to_lateral_flow_immunoassays.pdf
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6350463/
https://www.bakerlab.org/wp-content/uploads/2015/12/Holstien_Anal_Bioanal_Chem_2015.pdf
https://www.nature.com/articles/s41598-021-87072-7
https://www.researchgate.net/topic/Nitrocellulose