Membrane Nitrocellulose Anns a’ Sruth taobhach Bidh Assay a ’tighinn às deidh an sampall agus an pad conjugate. Canar membran Nitrocellulose cuideachd ri substrate substrate agus is e aon de na pàirtean as riatanach agus mothachail a dh ’ionnsaigh toraidhean an deuchainn a chaidh a dhèanamh air an Measadh Sruth lateral. Anns an Lateral Flow Assay, dh ’fhaodadh diofar stuthan a bhith air an cleachdadh leithid acetate ceallalose, polyvinylidene fluoride (PVDF), nylon atharraichte le cosgais, agus polyethersulfone (PES), msaa. Anns an membran Nitrocellulose, tha meud pore eadar-dhealaichte, porosity, tiugh , agus làimhseachadh ceimigeach. Chan eil cuairteachadh co-ionann de pores aig memblan Nitrocellulose agus mar sin is fheàrr an ùine sruthadh capillary. Mus gluais thu nas fhaide a-steach don reusanachadh tha e cudromach fios a bhith agad mun t-sruthadh capillary. Gu bunaiteach, tha ùine sruthadh capillary air a thomhas ann an diogan no ceudameatairean agus is e seo an ùine iomlan a ghabh an sampall a lìonadh gu tur anns an stiall deuchainn no an inneal Assay Flow Assay.
Bidh membran nitrocellulose ag obair mar bhuidheann giùlain airson na antibodies air an inneal assay sruthadh lateral. Bidh iad cuideachd air an cleachdadh airson sgrìonadh de dhiofar phròiseasan agus sheòrsaichean de antibodies ie monoclonals agus tha seo a ’tachairt mar thoradh air atharrachadh an enzymoimmounoassay.
Air an membran nitrocellulose, bidh na antibodies a ’fuireach agus a’ tighinn còmhla ris na gràinean bith-eòlasach an dara cuid latex no gràinean òir. Chan eil cead aig na antibodies gluasad agus tha iad gan gluasad air an membran nitrocellulose air sgàth diofar adhbharan. Leis gu bheil loidhnichean deuchainn agus loidhnichean smachd air an assay sruthadh lateral, tha na antibodies ceangailte eadar an dà loidhne sin. A ’beachdachadh air an loidhne deuchainn, tha e air a chleachdadh gus am pròtain sampall a cheangal ach tha an loidhne smachd aig na antibodies sònraichte do ghnèithean a thathas a’ cleachdadh gus na antibodies san t-sampall a lorg tuilleadh. Is e adhbhar eile a tha na antibodies a ’fuireach air an membran nitrocellulose meud pore an fhilm cùil. Chan eil am film cùl-taic neo-porous den membran nitrocellulose a ’leigeil leis na antibodies sleamhnachadh dheth seach gu bheil iad air an làimhseachadh gu teann agus mar sin fuireach air an membran. Bidh seo cuideachd a ’cuideachadh le bhith a’ lughdachadh caochlaideachd.
Is e factaran cudromach eile a tha a ’toirt air na antibodies fuireach air an membran nitrocellulose taghadh de diluent antibody, dòigh tiormachaidh, glacadh dùmhlachd antibodies, agus an ìre de sgaoileadh ath-bheachdan. Feumar tiormachadh ceart gus dèanamh cinnteach gu bheil na antibodies glacaidh a ’faighinn grèim air an membran; a dh ’aindeoin sin, bidh buill-bodhaig le taic a’ toirt mòran ùine airson tiormachadh an taca ris na buill-bodhaig gun taic. A bharrachd air iom-fhillteachd, draghan luchd-cleachdaidh, ullachadh sampall, cumail suas, ath-riochdachadh, agus mìneachadh toradh a tha furasta a chleachdadh, bu chòir dèanamh cinnteach an-còmhnaidh gu bheil lorg mothachail air paramadairean sònraichte. Tha cuid de na h-inbhean sin, leithid mìneachadh toradh agus cugallachd, gu mòr an urra ri gluasad riochdairean lorg agus gleidheadh spàsail le paramadairean an àite deuchainn.
Is e dòigh eile a tha cuideachail ann a bhith a ’toirt air antibodies fuireach air an membran nitrocellulose an ceangal covalent de na antibodies ri membran an Assay Flow Assay. Cuideachd, tha gluasad neo-sheasmhach nan antibodies air an membran nitrocellulose de LFA a ’toirt fa-near comas làidir nan memblan nitrocellulose ann a bhith a’ ceangal antibodies air. Mar a chaidh a ràdh roimhe seo anns an Assay Flow Assay tha mìrean ann a tha mothachail agus deatamach airson deuchainn an t-sampall. A ’ceangal seo ris na mìrean òir colloidal, tha iad air dearbhadh gu bheil na h-antigens a’ fuireach air an membran ceallalose. Anns a ’phròiseas seo, is e a’ chiad cheum a bhith a ’gabhail a-steach fulangach an antibody a dh’ fheumar air uachdar nanoparticle òr colloidal. Is e seo aon den fheadhainn as dùbhlanaiche anns an Lateral Flow Assay. Airson an adhbhair seo, chaidh na mìrean co-cheangail a chruthachadh a bheir air falbh gu furasta na antibodies, moileciuilean agus eileamaidean eile fuireach air an membran nitrocellulose.
Tha seo cuideachd a ’tabhann ceangal agus còmhdach furasta de na antibodies air an uachdar a’ toirt a-steach mion-sgrùdaidhean eile agus eadhon biomolecules. A bharrachd air an sin, tha na grìogagan latex anns an assay sruthadh lateral cuideachd feumail ann a bhith a ’toirt air antibodies fuireach air an membran nitrocellulose. Cuideachd, faodaidh co-fhulangas fulangach cuideachadh le bhith a ’toirt air antibodies fuireach air an membran nitrocelluse anns an deuchainn assay sruthadh lateral. Eadhon ged a dh ’fhaodadh na pròiseasan agus na h-adhbharan sin toirt air antibodies fuireach air an membran nitrocellulose den Lateral Flow Assay, tha iad a’ toirt ùine agus pròiseasan glè fhada Chan e a-mhàin seo, ach tha feum air uidheamachd mòr agus rudan eile cuideachd a tha ga dhèanamh hectic agus glè cosgail. Cuideachd, tha cuid de dh ’adhbharan a’ feumachdainn optimachadh gnìomhach a dhèanamh air a ’pH agus is e rud farsaing a tha seo, mar sin, chaidh dòighean-obrach agus pròiseasan ùra a thoirt a-steach don inneal Assay Flow Assay a tha a’ leantainn gu cleachdadh dhòighean eile. Tha càraid de antibodies air an gluasad gu sònraichte air nitrocellulose le bhith a ’gabhail a-steach corporra. Le freumhaichean domhainn ann an rannsachadh, faodaidh na antibodies fuireach air an membran nitrocellulose mar thoradh air an eadar-obrachadh hydrophobic agus dipolar sònraichte eadar an dà chuid de na raointean pròtain agus nitrocellulose, a tha a ’leantainn gu gleidheadh stiùireadh antibodies.
Gus a cho-dhùnadh agus geàrr-chunntas a dhèanamh air sgàth an tuairisgeul gu h-àrd, tha nitrocellulose na phàirt chudromach den assay sruthadh lateral agus an inneal a chaidh a chleachdadh airson an deuchainn. Is e aon de na factaran as cudromaiche agus deatamach a tha a ’dearbhadh an Assay Flow Assay agus cho cugallach‘ sa tha an Stuth Membrane no Membrane Nitcocellulose. Tha na loidhnichean deuchainn is smachd air an tarraing thairis air an membran gus dèanamh cinnteach gu bheil na antibodies air an ceangal agus air an glacadh gu math. Faodaidh dòrtadh neo-shònraichte air na loidhnichean deuchainn agus smachd buaidh a thoirt air cugallachd nan toraidhean, a ’leantainn gu luachan toradh meallta. Seach gur e nitrocellulose aon de na pàirtean den assay sruthadh fadalach bhon tèid an sampall seachad. Bhon sampall, bidh na antibodies agus na pàirtean antigenic den dà chuid an sampall agus an inneal a ’ceangal ri chèile agus a’ dol air adhart chun ath phàirt. Às an sin, bidh an sampall a ’sruthadh chun an membran nitrocellulose a tha mar thoradh air sin a’ toirt a-steach na antibodies agus antigens a tha riatanach airson an deuchainn. Chaidh na feartan agus na h-adhbharan a tha a ’toirt air falbh antigen air an membran nitrocellulose a mhìneachadh gu mionaideach gu h-àrd agus mar sin a’ còmhdach cuspair a ’phàipeir.
iomraidhean
https://www.creative-diagnostics.com/Immunochromatography-guide.htm
https://fnkprddata.blob.core.windows.net/domestic/download/pdf/IBS_A_guide_to_lateral_flow_immunoassays.pdf
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6350463/
https://www.bakerlab.org/wp-content/uploads/2015/12/Holstien_Anal_Bioanal_Chem_2015.pdf
https://www.nature.com/articles/s41598-021-87072-7
https://www.researchgate.net/topic/Nitrocellulose
