Como funciona un ensaio de fluxo lateral?
Antes de entrar nos principios de traballo e funcionamento do Fluxo lateral ensaio é importante facer unha breve introdución sobre o Ensaio de caudal lateral. Ensaio de fluxo lateral ou chamado con outro nome, é dicir, utilízase a inmunocromatografía para detectar a presenza ou ausencia dos analitos para obter os resultados desexados. Os principais actores implicados neste grupo son o antíxeno, as especies de anticorpos e o espécime ou a matriz. Ademais, Ensaios de fluxo lateral úsanse para unha serie de fins de detección ou diagnóstico, como son usados para a detección de cancro por marcador de cancro, embarazo, detección de abuso ou sobredose de drogas, axentes patóxenos, enfermidades infecciosas e tamén para marcadores cardíacos.
O funcionamento do ensaio de fluxo lateral baséase en 4 facetas. En primeiro lugar, é un dispositivo que ten unha almofada de mostra, unha almofada de conxugado, unha liña de proba e unha liña de control (tira de nitrocelulosa). Cada parte deseñado está separada por unha pequena distancia que permite o bo fluxo da mostra. O primeiro paso para usar este dispositivo é que a mostra se coloque no dispositivo que flúe completamente ao dispositivo de fluxo lateral. Unha vez que flúe prodúcese o proceso de filtración onde as partículas non desexadas ou indesexables son neutralizadas ou filtradas. Dentro da duración determinada da finalización da proba de ensaio de fluxo lateral, prodúcese todo o proceso e así pódense ver os resultados. Cando a mostra chega á almofada conxugada do dispositivo, as partículas secas da almofada mestúranse coas partículas da mostra.
O seguinte paso que ocorre é o fluxo de nanopartículas unidas a analitos e o acceso ás liñas de control que leva aos resultados. O exemplar pode entón comezar a fluír cara á almofada conxugada, que contén nanopartículas de alta cor ou fluorescentes cun anticorpo na capa superior. Tamén hai unha almofada que absorbe completamente a mostra ou o licor da mostra para garantir que non quede ningún líquido ao redor das liñas de proba e control. A liña de control no dispositivo de fluxo lateral que está etiquetado como C está composta por glándulas de afinidade que axudan aínda máis a unir o conxugado de nanopartículas con ou sen a presenza dun analito na solución para asegurarse de que o ensaio funciona correctamente en lugar do doutro xeito. . Basicamente, o método de proba usando este dispositivo baséase nos aspectos da reacción antíxeno-anticorpo. Como se mencionou anteriormente, as probas de ensaio de fluxo lateral poden dar a lectura en dúas formas cualitativas ou semi-cuantitativas.
Levándoos cara á elaborada explicación, a primeira etapa é a almofada sobre a que a mostra flúe e despois é absorbida. Existe a posibilidade de que o filtro estea na almofada da mostra para fluír a cantidade precisa e precisa da mostra. A segunda etapa está na almofada conxugada. A almofada conxugada comeza a funcionar despois de que a mostra se absorbe e ten etiquetas conxugadas e anticorpos que calcularán se os analitos están presentes na mostra ou non para os eventos de unión. Despois destas dúas etapas, o traballo da membrana de nitrocelulosa comeza a funcionar. Na membrana de nitrocelulosa, os analitos ou os anticorpos presentes na mostra e na almofada conxugada uniranse aos da almofada de nitrocelulosa. Despois disto, pasará á almofada absorbente que axudará a absorber unha cantidade extra de mostra e a producir os resultados.
Para exemplificar o funcionamento do Proba de ensaio de caudal lateralpódese tomar o exemplo do kit de proba rápida de anticorpos de Covid-19. Cando a mostra ou a mostra engádense á almofada do dispositivo de ensaio de fluxo lateral, pasa a través dunha película presente no dispositivo chamada película de filtro. Unha vez superada, probarase a presenza ou ausencia do analito obxectivo e se a mostra terá os analitos desexables, fusionarase cun antíxeno chamado antíxeno etiqueta de ouro coloidal que terá unha banda de cores. Se hai unha banda de cores, denota a presenza de analitos diana na mostra que se engadiu á proba de ensaio de fluxo lateral para fins de proba e diagnóstico. E se non hai unha liña de cores significa que os resultados non son válidos. Por último, hai unha liña de control do dispositivo de ensaio de fluxo lateral que mostra que se engadiu cantidade suficiente da mostra ao dispositivo.
Para comprender que como funciona un ensaio de fluxo lateral tamén é pertinente discutir a interpretación dos resultados. Primeiro de todo, é importante comprender as distintas partes do dispositivo como almofada conxugada, almofada de mostra, etc. Entón, cando os anticorpos conxugados se reúnen nas liñas de control, as liñas comezan a aparecer para amosar os resultados. As liñas visibles das etiquetas de nanosfera douradas que son as etiquetas máis empregadas, son de cor vermella e non requiren ningún desenvolvemento. As dimensións do nanopartículas de ouro determinar os distintos tons de vermello e a forza demóstrana o limiar dos anticorpos conxugados confinados nas liñas inmobilizadas. Se aparece unha liña vermella na liña de proba, entón indica que o resultado é positivo. Falando da intensidade, depende da cantidade de analito presente na matriz do exemplar. Ademais, a aparición da liña de control no dispositivo de ensaio de fluxo lateral é imprescindible para asegurar que se deu cantidade suficiente de mostra e que a cantidade non sexa menor para probar e dar resultados precisos.
Conclusión
O funcionamento do Ensaio de caudal lateral é relativamente máis doado e comprensible. Dado que non están limitados nos laboratorios, máis ben funcionan con fins fóra do laboratorio tamén se poden usalos facilmente e comprender diferentes partes. As notables propiedades do dispositivo de ensaio de fluxo lateral e nanopartículas de ouro, fixeron das probas un proceso máis sinxelo e tamén accesible. Teñen un papel inmenso en fins clínicos e diagnósticos.
References
https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/lateral-flow-test
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics#target