Como funciona un ensaio de fluxo lateral?
Antes de entrar no funcionamento e os principios de funcionamento do ensaio de fluxo lateral , é importante facer unha breve introdución sobre este produto. O ensaio de fluxo lateral, ou doutro xeito chamado inmunocromatografía, utilízase para detectar a presenza ou ausencia de analitos para obter os resultados desexados. Os principais actores implicados neste grupo son o antíxeno, as especies de anticorpos e a mostra ou a matriz. Ademais, os ensaios de fluxo lateral utilízanse para diversos fins de detección ou diagnóstico, como a detección de cancro mediante marcadores de cancro, embarazo, detección de abuso ou sobredose de drogas, patóxenos, enfermidades infecciosas e tamén para marcadores cardíacos.
O funcionamento do ensaio de fluxo lateral baséase en 4 facetas. En primeiro lugar, é un dispositivo que ten unha almofada de mostra, unha almofada de conxugado, unha liña de proba e unha liña de control ( tira de nitrocelulosa ). Cada parte deste deseño está separada por unha pequena distancia que permite o fluxo suave da mostra. O primeiro paso para usar este dispositivo é colocar a mostra no dispositivo que flúe completamente ao dispositivo de fluxo lateral. Unha vez que flúe, prodúcese o proceso de filtración onde as partículas non desexadas ou indesexables son neutralizadas ou filtradas. Dentro da duración dada da proba de ensaio de fluxo lateral, prodúcese todo o proceso e, polo tanto, pódense ver os resultados. Cando a mostra chega á almofada de conxugado do dispositivo, as partículas secas da almofada mestúranse coas partículas da mostra.
O seguinte paso que ocorre é o fluxo de nanopartículas unidas a analitos e o acceso ás liñas de control que leva aos resultados. O exemplar pode entón comezar a fluír cara á almofada conxugada, que contén nanopartículas de alta cor ou fluorescentes cun anticorpo na capa superior. Tamén hai unha almofada que absorbe completamente a mostra ou o licor da mostra para garantir que non quede ningún líquido ao redor das liñas de proba e control. A liña de control no dispositivo de fluxo lateral que está etiquetado como C está composta por glándulas de afinidade que axudan aínda máis a unir o conxugado de nanopartículas con ou sen a presenza dun analito na solución para asegurarse de que o ensaio funciona correctamente en lugar do doutro xeito. . Basicamente, o método de proba usando este dispositivo baséase nos aspectos da reacción antíxeno-anticorpo. Como se mencionou anteriormente, as probas de ensaio de fluxo lateral poden dar a lectura en dúas formas cualitativas ou semi-cuantitativas.
Levándoos cara á elaborada explicación, a primeira etapa é a almofada sobre a que a mostra flúe e despois é absorbida. Existe a posibilidade de que o filtro estea na almofada da mostra para fluír a cantidade precisa e precisa da mostra. A segunda etapa está na almofada conxugada. A almofada conxugada comeza a funcionar despois de que a mostra se absorbe e ten etiquetas conxugadas e anticorpos que calcularán se os analitos están presentes na mostra ou non para os eventos de unión. Despois destas dúas etapas, o traballo da membrana de nitrocelulosa comeza a funcionar. Na membrana de nitrocelulosa, os analitos ou os anticorpos presentes na mostra e na almofada conxugada uniranse aos da almofada de nitrocelulosa. Despois disto, pasará á almofada absorbente que axudará a absorber unha cantidade extra de mostra e a producir os resultados.
Para exemplificar o funcionamento da proba de ensaio de fluxo lateral , pódese tomar o exemplo do kit de proba rápida de anticorpos da Covid-19. Cando a mostra ou o espécime se engade á almofada de mostras do dispositivo de ensaio de fluxo lateral, pasa a través dunha película presente no dispositivo chamada película filtrante. Unha vez pasada, comprobarase a presenza ou ausencia do analito diana e, se a mostra contén os analitos desexables, amalgamarase cun antíxeno chamado antíxeno etiquetado con ouro coloidal, que terá unha banda coloreada. Se hai unha banda coloreada, indica a presenza de analitos diana na mostra que se engadiu á proba de ensaio de fluxo lateral con fins de análise e diagnóstico. E se non hai unha liña coloreada, significa que os resultados non son válidos. Por último, pero non menos importante, hai unha liña de control do dispositivo de ensaio de fluxo lateral que mostra que se engadiu unha cantidade suficiente de mostra ao dispositivo.
Para comprender como funciona un ensaio de fluxo lateral, tamén é pertinente analizar a interpretación dos resultados. En primeiro lugar, é importante comprender as diferentes partes do dispositivo, como a almofada de conxugado , a almofada de mostra , etc. Entón, cando os anticorpos conxugados se xuntan nas liñas de control, comezan a aparecer liñas para mostrar os resultados. As liñas visibles nas etiquetas de nanosferas de ouro, que son as etiquetas máis utilizadas, son de cor vermella e non requiren ningún revelado. As dimensións das nanopartículas de ouro determinan os diferentes tons de vermello, e a forza demóstrase polo limiar dos anticorpos conxugados confinados nas liñas inmobilizadas. Se aparece unha liña vermella na liña de proba, indica que o resultado é positivo. Falando da intensidade, depende da cantidade de analito presente na matriz da mostra. Ademais, a aparencia da liña de control no dispositivo de ensaio de fluxo lateral é imprescindible para garantir que se administrou unha cantidade suficiente de mostra e que a cantidade non sexa menor para a análise e dar resultados precisos.
Conclusión
O funcionamento do ensaio de fluxo lateral é relativamente máis sinxelo e comprensible. Dado que non se limitan aos laboratorios, senón que funcionan para fins fóra do laboratorio, pódese usalos facilmente e comprender as diferentes partes. As notables propiedades do dispositivo de ensaio de fluxo lateral e as nanopartículas de ouro fixeron que as probas sexan un proceso máis sinxelo e tamén accesible. Teñen un papel inmenso nos fins clínicos e de diagnóstico.
References
https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/lateral-flow-test
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics#target