Ensaios de fluxo lateral: principios, deseños e etiquetas

Os ensaios de fluxo lateral son os dispositivos que se empregan para realizar diferentes tipos de probas e probas no punto de atención, e tamén se coñecen como probas realistas. Os ensaios de fluxo lateral son dispositivos pequenos e mínimos que se empregan en case todos os campos da medicina onde está presente a detección de analitos. Observando o escenario actual a nivel mundial, tamén se empregan para realizar probas de coronavirus. Dado que son fiables, rendibles e accesibles para todos, utilízanse para probas de embarazo , infeccións bacterianas, infeccións virais e infeccións parasitarias. As probas de ensaios de fluxo lateral non requiren ningún tipo de persoal adestrado ou especializado. A técnica de ensaio de fluxo lateral funciona sobre a amalgama bioquímica dos anticorpos e antíxenos ou a hibridación do ADN diana ao ADN.

Principios

Os principios nos que funciona o ensaio de fluxo lateral son bastante básicos. No ensaio de fluxo lateral, a mostra líquida ou a matriz flúe coa axuda das forzas eternas, é dicir, a acción capilar. A matriz ten o analito diana, que é necesario para a detección e produción de resultados. O líquido flúe a través das diversas tiras poliméricas onde se poden combinar os analitos e as moléculas. Todo o principio funciona nas diferentes partes do ensaio de fluxo lateral, xa que hai diferentes almofadas polas que o líquido debe fluír para producir os resultados. O primeiro paso para usar este dispositivo é colocar a mostra no dispositivo que flúe completamente ao dispositivo de fluxo lateral. Unha vez que flúe, prodúcese o proceso de filtración onde as partículas non desexadas ou indesexables son neutralizadas ou filtradas. Dentro da duración dada da proba de ensaio de fluxo lateral, prodúcese todo o proceso e, polo tanto, pódense ver os resultados. Cando a mostra chega á almofada de conxugado do dispositivo, as partículas secas na almofada mestúranse coas partículas da mostra. O seguinte paso que ocorre é o fluxo de nanopartículas unidas ao analito e o acceso ás liñas de control que conducen aos resultados. A mostra pode entón comezar a fluír cara á almofada de conxugado, que contén nanopartículas de alta cor ou fluorescentes cun anticorpo na súa capa superior. Tamén hai unha almofada de mecha que absorbe completamente a mostra ou o licor da mostra para garantir que non quede líquido arredor das liñas de proba e control. Unha vez finalizado o proceso seguindo o seu principio de funcionamento, conséguense os resultados.

deseños

Os deseños de ensaios de fluxo lateral están compostos por un sistema cromatográfico. No sistema de cromatografía, os compoñentes sepáranse en función do seu movemento a través da membrana de reacción e tamén da reacción inmunitaria, como a reacción de antíxeno e anticorpo ou a hibridación do ADN, e o analito diana do ácido nucleico. Ademais, o ensaio de fluxo lateral está deseñado cunha almofada de mostra, unha membrana de conxugado, unha membrana de nitrocelulosa, etiquetas, nanopartículas, unha almofada de absorción adsorbente e o tampón unido a ela só nalgúns dispositivos. Os deseños de ensaios de fluxo lateral dependen do uso, a estabilidade, o rendemento e a seguridade. Hai módulos que se deben seguir para a formación dos ensaios de fluxo lateral e os dispositivos de proba. Nos deseños de ensaios de fluxo lateral, os requisitos físicos son moi importantes. Estes requisitos físicos do LFA son as dimensións do cartucho, as características do cartucho, é dicir, a almofada de conxugado e a almofada de mostra, as especificacións dos lectores, etc. O deseño do LFA tamén depende da funcionalidade e as características dun deseño particular. Por exemplo, a funcionalidade e as características relacionadas con ela incluirán o método de análise, o formato para o analito diana da proba, o rendemento clínico, o límite de sensibilidade e especificidade, etc. Os outros dous factores importantes no deseño do ensaio de fluxo lateral son os requisitos de manipulación e de plántulas. Os requisitos de manipulación do deseño de LFA son máis pertinentes ao ambiente e á vida útil da casca. Mentres que os requisitos de mostraxe do deseño para a proba de ensaio de fluxo lateral son os tipos de mostra, a temperatura á que se pode almacenar a mostra, a temperatura requirida para o almacenamento e o tratamento da mostra.

etiquetas

No ensaio de fluxo lateral, utilízanse diferentes materiais aos que se lles dá o nome de etiquetas. Algunhas das etiquetas que se usan en LFA son nanopartículas de ouro, puntos cuánticos, contas de látex de cores, nanopartículas de prata, nanopartículas de selenio, encimas, liposomas e moitos outros. Aquí están algunhas das etiquetas en LFA que serán discutidas. Calquera etiqueta que se utilice no ensaio de fluxo lateral debe ser detectable a unha concentración moi baixa e as propiedades das etiquetas deben manterse ata a conxugación coas moléculas de biorrecoñecemento. En primeiro lugar, as nanopartículas de ouro coloidal son unha das etiquetas máis comúns. As partículas de ouro coloidal están inmobilizadas e teñen a forma perfecta da esfera. Ademais, as nanopartículas de ouro coloidal teñen unha afinidade relativamente alta cara ás biomoléculas o que facilita a súa funcionalidade. O seu tamaño e forma varían. Algunhas das características máis destacadas das nanopartículas de ouro son a súa composición ecolóxica, a súa alta afinidade cara ás moléculas e proteínas, a boa sinalización óptica e a súa estabilidade. Outra etiqueta que se usa nos LFA son as partículas e agregados magnéticos que se usan para a sinalización nos dispositivos. As partículas magnéticas de cores en LFA úsanse ou producen liñas de cores que o instrumento ou un lector de tiras le. Tamén hai un lector de ensaios magnéticos que se usa para ler os sinais que proceden deles. As enzimas tamén se usan en LFA e aumentan un paso en todo o proceso. Engade o paso de engadir o substrato adecuado despois de completar o ensaio. O carbono coloidal tamén se usa en LFA e cor negra. Pola súa cor, son facilmente detectables cunha alta sensibilidade.

Conclusión

As probas de ensaio de fluxo lateral son un dos dispositivos máis empregados. Os principios, deseños e etiquetas do ensaio de fluxo lateral poden ser diferentes nalgúns dos dispositivos de ensaio de fluxo lateral, o que tamén modifica o funcionamento dese dispositivo de ensaio de fluxo lateral en particular. Todos os principios, deseños e etiquetas son partes importantes dos ensaios de fluxo lateral.

References

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4986465/

https://nanocomposix.com/pages/lateral-flow-assay-design

https://www.nature.com/articles/s41598-018-35694-9

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S131961031400129X