Que é o ensaio inmunocromatográfico de fluxo lateral?

Os ensaios inmunocromatográficos de fluxo lateral son os dispositivos que se empregan para a detección de analitos na mostra dada. A inmunocromatografía é a combinación de cromatografía e inmunoensaios. Os LFIA son os dispositivos máis económicos e amplamente utilizados para realizar diferentes tipos de probas. Hai diferentes partes dos ensaios inmunocromatográficos de fluxo lateral, como a almofada de mostra, a membrana de conxugado, a membrana de nitrocelulosa e a almofada adsorbente. Non obstante, existen diferentes tipos de ensaios inmunocromatográficos de fluxo lateral, como o creado a partir dunha única peza ou folla de membrana de celulosa que logo se fabrica mediante o proceso de corte por láser. En comparación con outras formas de inmunoensaio, como o ensaio inmunosorbente ligado a encimas (ELISA) ou o western blot, os LFIA son mellores, fiables e rápidos. Non só iso, senón que tamén ofrecen as vantaxes da rendibilidade e a redución de materiais. Ademais, aforran tempo e producen resultados nun curto período de tempo que é de aproximadamente 20 minutos ou uns 20 minutos. Os ensaios inmunocromatográficos de fluxo lateral son compatibles cunha ampla gama de matrices como soro, urina, seme, sangue e saliva. Os ensaios contemporáneos utilízanse para diferentes fins de análise, como probas de embarazo , probas de diagnóstico rápido, gripe, tuberculose (TB) e malaria. Tamén se usan para análises domésticas, probas de seguridade alimentaria, detección de axentes biolóxicos e medicina veterinaria.

Como se mencionou anteriormente, os ensaios inmunocromatográficos de fluxo lateral tamén se fabrican cunha soa peza de membrana de nitrocelulosa, o que produce resultados máis rápidos e precisos. Polo tanto, probáronse para a detección da proteína 2 rica en histidina de Plasmodium falciparum (PfHRP2), un biomarcador de infección por malaria detectable a baixas concentracións de ata 4 ng mL−1 e que se pode ver a simple vista. Ademais, non houbo ningún elemento de reactividade cruzada con algúns dos outros biomarcadores proteicos de Plasmodium. Agora, cando o ensaio inmunocromatográfico de fluxo lateral creou un cunha lámina de membrana de nitrocelulosa utilizada para as probas, produciu resultados fiables e precisos en comparación cos LFIA preexistentes para a detección de PfHRP2. Ademais, pode realizar probas de detección de malaria e tamén se poden analizar outros biomarcadores proteicos.

Hai algúns principios nos que funciona o ensaio de inmocromatografía de fluxo lateral . En primeiro lugar, as técnicas de traballo son as mesmas que as da técnica ELISA tipo sándwich, pero a diferenza reside no proceso no que a acción capilar da reacción inmunolóxica se aplica a través do papel cromatográfico. En segundo lugar, cando a matriz da mostra se deixa caer sobre a almofada de mostra do dispositivo LFIA, fórmase un complexo coñecido como inmunocomplexo (complexo Ab-Ag) debido aos antíxenos da almofada de mostra co anticorpo. Este inmunocomplexo viaxa entón cara ás outras partes do dispositivo LFIA e entra en contacto cos anticorpos bloqueados na membrana de nitrocelulosa do dispositivo. Cando se forman máis complexos, comeza a aparecer a liña vermella-púrpura que denota o resultado positivo, é dicir, o antíxeno obxectivo está presente na mostra. A unidade inmunocromatográfica créase unindo a almofada de mostra ao extremo da membrana.

Para realizar unha proba inmunocromatográfica no dispositivo LFIA requírense catro pasos . O primeiro paso é colocar a mostra na almofada de mostra. Despois de que a mostra pase pola almofada de mostra, comeza a solubilización das moléculas. Aquí, a solubilización da molécula detectora é importante xa que, para a protección dos resultados positivos, uniranse ao analito diana na mostra. Despois destes pasos, comeza a acción capilar. Toda a mestura de fluído lévase á membrana de nitrocelulosa coa axuda da acción capilar. Agora, na membrana de nitrocelulosa, haberá o antíxeno ou anticorpo inmobilizado que se combinará co analito diana, dando lugar a resultados positivos se están presentes na mostra. Se o resultado é positivo, aparecerá unha liña rosa ou morada. A almofada adsorbente do final absorbe calquera parte adicional non absorbida da mostra.

Para resumir as vantaxes do ensaio inmunocromatográfico de fluxo lateral , é fiable, rápido, preciso e doado de usar. Ademais, é rendible e pódese empregar para diferentes fins de diagnóstico. Non hai limitacións nin obstáculos polos cambios climáticos nin reservas para diferentes climas. É só para un só uso, polo que son probas hixiénicas e seguras. Ademais, están dispoñibles facilmente sen receita e non é necesario obter receita médica, o que aforra tempo. Por último, require unha cantidade moi pequena de volume de mostra para someterse ao procedemento de proba. Ademais das vantaxes, tamén ten algunhas limitacións. En primeiro lugar, tende a obter resultados de calidade en lugar de resultados cuantitativos. Por último, non é tan sensible como outros dispositivos porque pode detectar dous analitos simultaneamente.

O ensaio inmunocromatográfico de fluxo lateral ten amplas aplicacións . Úsase para múltiples fins no diagnóstico clínico para o cribado e a detección de diversos marcadores clínicos. Ademais, tamén se usa para probas domiciliarias e para detectar diferentes tipos de enfermidades, como enfermidades de transmisión sexual, malaria, tuberculose, enfermidades hepáticas e saúde reprodutiva de ambos os sexos. A gonadotropina coriónica humana (HCG) ou unha proba de embarazo tamén se pode detectar mediante o ensaio inmunocromatográfico de fluxo lateral. O LFIA é o método de proba máis preferido para detectar calquera tipo de infeccións virais, bacterianas ou mesmo parasitarias, como o dengue, a sífilis, a filariose, etc. Tamén se usa na ciencia forense e en biomarcadores do cancro.

Conclusión

O ensaio inmunocromatográfico de fluxo lateral é o método preferido e máis sinxelo para realizar calquera tipo de proba. Está tecnoloxicamente equipado, é doado de usar, fiable e é un método eficaz. Existen algunhas limitacións que non pesan moito en comparación cos beneficios do ensaio inmunocromatográfico de fluxo lateral. Considéranse contemporáneos e convencionais para a detección de probas e o seu amplo uso demostra a súa autenticidade e credibilidade. Polo tanto, os ensaios inmunocromatográficos de fluxo lateral pódense usar para unha ampla gama de fins relacionados con calquera tipo de proba médica.

References

https://www.onlinebiologynotes.com/immunochromatography-assay-ica-principle-components-steps-merits-limitations-and-applications/

https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2021/an/d0an02073g#!divAbstract

https://www.sciencedirect.com/topics/chemistry/immunochromatography