Que é unha proba de fluxo lateral?
O ensaio de fluxo lateral (LFA) é un recoñecido método de diagnóstico para probas no punto de atención (POC) e a razón é o seu baixo custo e facilidade de uso. As probas de ensaio de fluxo lateral utilízanse para identificar biomarcadores en calquera mostra de urina, saliva, sangue, plasma, etc. con fins diagnósticos. Os LFA convencionais producen resultados semicuantitativos ou cualitativos, o que require o uso de instrumentos especializados para detectar resultados cuantitativos. O LFA é un método de proba baseado en papel para detectar e cuantificar analitos en mesturas complexas. A mostra colócase nun dispositivo de proba e os resultados preséntanse nun prazo de cinco a trinta minutos, aproximadamente. As aplicacións dos LFA ampliáronse a unha serie de áreas que requiren probas rápidas debido á súa rendibilidade e facilidade de fabricación.
A continuación descríbense as principais características da proba de fluxo lateral. Primeiro de todo, son desbotables o que significa que non se poden usar unha e outra vez. Ademais, non se poden lavar. Unha vez utilizados deben descartarse. En segundo lugar, son económicos e, polo tanto, son facilmente dispoñibles e accesibles. En terceiro lugar, son de natureza robusta, o que implica que se poden almacenar a temperatura ambiente e ter unha vida útil de varios anos.
Nos últimos tempos, houbo un mercado crecente e unha necesidade de ensaios de diagnóstico múltiples no punto de atención con liñas de probas completas que permitan a detección rápida e simultánea de múltiples analitos en mostras no punto de atención. Estes ensaios (posiblemente un único ensaio de campo baixo ) deberían ser o suficientemente sinxelos como para realizarse sen o apoio e a axuda dun laboratorio ou grupos de analistas químicos. Os ensaios de campo baixo son un procedemento preferido porque son baratos de fabricar, fáciles de usar e, o máis importante, amplamente recoñecidos polos usuarios finais e as autoridades reguladoras.
Para mencionar os tipos de ensaio de fluxo lateral, existen dous tipos de probas de ensaio de fluxo lateral. Os tipos de probas de ensaio de fluxo lateral baséanse na mostra que se vai analizar. Os dous tipos principais teñen subcategorías adicionais. Non obstante, o primeiro tipo de ensaio de fluxo lateral chámase inmunoensaio de fluxo lateral e o segundo tipo de LFA chámase fluxo lateral de ácido nucleico. O inmunoensaio de fluxo lateral clasifícase en dúas partes. Unha funciona sobre a base de anticorpos que actúan como a parte principal da mostra para o seu recoñecemento. Mentres que a segunda ten varios axentes ou ingredientes de recoñecemento, como proteínas, hormonas, etc. O segundo tipo de ensaio de fluxo lateral chámase ensaio de fluxo lateral de ácido nucleico e axuda a detectar amplicóns que se puideron crear durante a reacción en cadea da polimerase (PCR).
Para desenvolver as probas de ensaio de fluxo lateral hai dous métodos que se poden empregar. O primeiro método chámase formato de varilla mentres que o segundo formato chámase casete aloxado. O seu funcionamento é o mesmo pero dependen do formato, requirimento do mercado, matriz e industria. Na proba de ensaio de fluxo lateral, hai dous formatos que funcionan. Un coñécese como bocadillo e o segundo coñécese co nome do formato competitivo. O formato sándwich úsase para a detección de grandes analitos que terían dous sitios de unión ou epítopos. O resultado do formato sandwich está na intensidade do sinal no punto da liña de proba que dirixe proporcionalmente á cantidade de analito presente na mostra. Eliminando o factor da cantidade de analito, se a liña de control ten unha especie de anticorpo terá o poder de unir as nanopartículas que levarán a producir o sinal da liña de control para mostrar o bo funcionamento do ensaio de fluxo lateral.
Nas probas de ensaio de fluxo lateral, as nanopartículas actúan como reporteiros no resultado dunha proba particular. O resultado da proba pódese ler e analizar a través de ollos que tamén se denominan cualitativos ou semi-cuantitativos ou simplemente coa axuda dun instrumento que se denomina lectura cuantitativa. A proba de ensaio de fluxo lateral é máis viable e pode producir resultados verdadeiros e desexables cando o tamaño das partículas está entre 20 nm e 50 nm. Para que o sinal resultante sexa máis forte, hai partículas fluorescentes que se poden empregar para obter un sinal aínda máis forte na produción ou nos resultados da mostra. Chegando ao formato competitivo da proba de ensaio de fluxo lateral, úsanse para a detección dos analitos, especialmente no caso de que os pares de anticorpos non estean dispoñibles ou o analito non sexa grande senón pequeno para unha infinidade de eventos de unión aos anticorpos. A liña de proba normalmente contén a molécula de analito, que normalmente é un complexo proteína-analito, e a almofada conxugada comprende o conxugado de detección anticorpo-nanopartícula no formato competitivo da proba de ensaio de fluxo lateral. Se o analito obxectivo é evidente, o conxugado unirase a el, evitando que se unise ao analito na liña de proba.
A análise das probas de ensaio de fluxo lateral baséase nos tres tipos diferentes de resultados que poden resultar confusos. Non obstante, os tres tipos principais destes resultados son cualitativos, semi-cuantitativos ou cuantitativos. Para a análise cuantitativa das probas de ensaio de fluxo lateral, a liña de proba compárase co estándar coñecido como estándar de calibración e logo convértese no valor de concentración dun analito. Non obstante, para obter resultados máis precisos e precisos recoméndase o lector de tiras para analizar e ler a proba.
Conclusión
Os ensaios de fluxo lateral son un dos procedementos máis usados e coñecidos a nivel mundial que teñen propiedades únicas. Ademais, as probas de fluxo lateral formaron parte da gran contribución ao sector sanitario e tamén nos países en desenvolvemento para os que o seu papel é inmenso. O seu uso e vantaxes non se limitan só aos laboratorios; máis ben estanse a empregar para probas domésticas e demostraron ser eficaces, fáciles de usar e rendibles. Polo tanto, as probas de ensaio de fluxo lateral e os seus diferentes tipos son útiles en diferentes fins diagnósticos e seguirán medrando con outros dispositivos se se fusionan para traer máis avance e crecemento cara a este sector.
References
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4986465/
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics#target
https://www.clinisciences.com/en/read/serological-tests-in-mycology-1190/lateral-flow-assay-lfa-2095.html