Ọsọ azụ nnwale bụ ngwaọrụ a na -eji maka nnwale ngwa ngwa n'ụlọ yana kwa maka nnwale ụlọ ọgwụ. Ha bụ ngwaọrụ kacha atụkwasị obi ma bụrụkwa nke a na -eji n'ihe fọrọ nke nta ka ọ bụrụ mba niile mepere emepe na emepe emepe. Ọzọkwa, ihe mpụta eru Nnwale Ntuziaka mmepe nwere ihe fọrọ nke nta ka ọ bụrụ nzọ ụkwụ iri nke na -ekpebi usoro mmepe nke nnwale nnwale azụ. Na -emekarị, Nnwale nnwale mpụta nwere mpempe akwụkwọ nlele, conjugate pad, akpụkpọ ahụ nitrocellulose, kpọọ mpe mpe mpe akwa mgbasa ozi, na ihe nchekwa. Agbanyeghị, enwere ike nwee mgbanwe ụfọdụ na aha mmado ebe enwere aha dị iche iche ejiri na nyocha nnwale mpụta.
Iji malite akwụkwọ ntuziaka mmepe mpụta mpụta, ọ dị mkpa ịtụle ihe ole na ole tupu ịmalite usoro. Nke mbụ, ọ dị mkpa ịtụle usoro a ga -ahọrọ maka nyocha nke mpụta ma ọ ga -abụ asọmpi ma ọ bụ usoro Sanwichi. N'ụzọ bụ isi, ntuziaka mmepe nke Nnwale Lateral flow Assay dabere na usoro mmepe nnwale. Nzọụkwụ mbụ dị oke mkpa na nke kachasị mkpa bụ ịchọpụta nnwale njikwa nke ga -enyere aka ịchọpụta onye nyocha nyocha na nlele. Ntụziaka mmepe a ga -enye usoro mmepe LFA n'ozuzu n'ihi na nyocha dị iche iche nwekwara usoro dị iche.
Nzọụkwụ mbụ iji gaa ntuziaka mmepe bụ nhọrọ nke nanoparticles. Nhọrọ nanoparticles dịgasị na nha na ọdịdị. Enwere nha dị iche iche maka nyocha nnwale mpụta. Enwekwara nanoparticles ọla edo 40nm nwere carbon ma ọ bụ elu citrate nke enwere ike iji ya mee ihe maka usoro mgbasa ozi nke protein. Nanoparticles ndị ọzọ enwere ike họrọ maka mmepe LFA gụnyere carboxyl gold, carboxyl gold nanoshells, wdg na -abụghị na enwere nyocha ndị ọzọ dị ka bekee cellulose, polystyrene nwere agba, na nyocha fluorescent. Ihe gbakwunyere na nhọrọ nke carboxyl gold nanoparticles bụ na maka usoro mgbasa ozi, a na -achọ ọgwụ mgbochi dị ole na ole yana n'ihi ihe ndị a, a na -emepụta njikọ nke bụ njikọ amide kwụsiri ike na enweghị mgbagha. Agbanyeghị, a ga -eburu n'uche na ike ndị na -esite na nanoparticles na antibodies sitere na gburugburu njikọ ha.
Nzọụkwụ nke abụọ bụ Nhọrọ Antibody. Nhọrọ onye na -emegide mmadụ bụ ihe dị oke mkpa n'ihi na arụmọrụ nke LFA na -adabere na njikọta ọgwụ mgbochi ọrịa, kinetik na ihe ndị ọzọ steric. Ọzọkwa, ijikọ ọgwụ mgbochi ọrịa dị mkpa maka ịchọpụta nsonaazụ ya. Ihe ọzọ dị mkpa mgbe ị na -ahọrọ ọgwụ mgbochi bụ ụdị abụọ ha. Ụdị mgbochi abụọ ahụ bụ monoclonal na polyclonal. Ọgwụ mgbochi monoclonal dị mfe imepụta ebe ọgwụ mgbochi polyclonal nwere mmetụta dị elu ma e jiri ya tụnyere monoclonal. N'ọzọ nke usoro nhọpụta mmadụ, a na -enwe usoro abụọ ọzọ, ya bụ, ịsachapụ mmadụ, yana mgbochi mgbochi. N'ime nhọrọ mgbochi mmadụ, azuoko a tụrụ aro bụ inyocha ihe ndị na -alụso ọrịa ọgụ ọgụ n'ihi na ekwesịrị ịnwale ha tupu oge eruo. Enwere ike nyochaa ma nwalee ihe ndị na -alụso ọrịa ọgụ ma nwalee ya site na iwu ụdị nnwale mbụ na mbido nke mpụta nke na -arụ ọrụ dị ka ngwaọrụ nlele nnwale. Ọrụ nke ọgwụ mgbochi ọrịa dị iche n'ụdị LFA dị iche iche. Dịka ọmụmaatụ, na ELISA, mmegharị ahụ adịghị mkpa nke ukwuu. Na -ekwu maka nnwale nnwale mpụta, enwere ọnọdụ ụfọdụ ọgwụ mgbochi ọrịa ga -enwerịrị ike ịme. Nke mbu, ọgwụ mgbochi ahụ kwesịrị ịdị na -arụ ọrụ ọbụlagodi mgbe ejikọtara ya na nanoparticles na iguzosi ike n'ezi ihe ha ekwesịghị imerụ ahụ n'ụzọ ọ bụla. Ọzọkwa, ha ga -enwerịrị ike inye mmeghachi omume ha ozugbo mgbe ihe nlele ahụ na -emegharị mmiri ọzọ. Oge nnabata n'ime ụdị nnwale ndị ọzọ dị ogologo ma e jiri ya tụnyere Nnwale Ọdịda Lateral nke njigide n'ahịrị ule ga -emerịrị n'ime oge nke sekọnd ole na ole.
Usoro nke atọ na usoro a bụ akpụkpọ ahụ nitrocellulose na ọ bụ akụkụ dị oke mkpa na LFA ebe ọ nwere ahịrị ule na akara. Akpụkpọ ahụ nitrocellulose nwekwara reagents na -arụ ọrụ iji rụpụta nsonaazụ ya. A na -enweta ya n'ụdị nha, porosities na atụmatụ. N'ezie, akpụkpọ ahụ nitrocellulose na -adabere na oge ịwụsa capillary. Site na oge nrugharị, ọ pụtara na oge achọrọ ka ihe nlele ga -agbarute ruo 4cm. N'ime usoro a, enwere usoro ọzọ a na -akpọ mbepụ akpụkpọ ahụ. Nchekwa nke otu protein dị warara nwere ike nwee mmetụta dị ukwuu na nsonaazụ ikpeazụ nke nyocha ọ bụla na -aga n'ihu. Ọ bụ ezie na enwere ike ịgbari ọtụtụ protein na 1x PBS, ụfọdụ na -enwe mmetụta nke ukwuu na pH, itinye nnu, yana ihe nrụpụta nke enwere ike ịkpọ aha trehalose. Iwepu Membrane bụ nzọụkwụ ọzọ dị mkpa na -abịa na nke a. N'ime usoro a, imebe nnwale nnwale mpụta nke mpụta bụ ka ọ gbanye ule ahụ wee chịkwaa ahịrị mgbochi nke dị na akpụkpọ ahụ nitrocellulose. Ihe dị mkpa ịtụle na nke a bụ akpụkpọ ahụ nitrocellulose ebe ekwuru na ọ gaghị edobe akpụkpọ ahụ nitrocellulose n'ebe enweghị mmiri ọ bụla kama ọ kpọnwụrụ akpọnwụ. Maka mmepe nke nnwale nnwale mpụta, okpomoku maka akpụkpọ ahụ nitrocellulose kwesịrị iru mmiri. Ebe enwere ụdị ule dị iche iche, ntụgharị usoro asọmpi na usoro Sanwichi dịkwa oke mkpa. Nlekọta ọgwụ mgbochi dị iche na usoro abụọ maka usoro Sanwichi ịta mgbochi mgbochi akwadoro bụ 1mg/ml maka naanị ọgwụ mgbochi na akara akara yana oke a nwere ike iru 0.5 ruo 2 mg/ml. N'ọzọ akpụkpọ ahụ nitrocellulose na ntuziaka mmepe mpụta mpụta, nzọụkwụ ọzọ agụnyere bụ nkwụsị mgbochi akpụkpọ ahụ. Ime nzọụkwụ a nwere ọtụtụ uru dị ka mmụba ka mma nke mmiri mmiri, nkwụsi ike nke ibe, yana igbochi njikọ na-abụghị nke a na-arụpụta ezigbo nsonaazụ. Maka imirikiti akpụkpọ ahụ nitrocellulose dị na mpụta mpụta mpụta, enwere ngwongwo nke agbakwunyere na maka ime ka akpụkpọ ahụ bụrụ hydrophilic.
Nzọụkwụ ọzọ bụ conjugate na conjugate pad. Maka ịmepụta nnwale nnwale mpụta ọ dị mkpa ịzụlite njikarịcha conjugating parameters. Mgbe a na -akwadebe conjugate maka nyocha mpụta mpụta ya, a na -ekesa ya ma kpoo ya na mpe mpe akwa conjugate. Maka iwulite njikọta nke ọgwụ mgbochi ọrịa nwere ike nwee ọtụtụ usoro. Nzọụkwụ ndị gụnyere n'ịzụlite ịdị n'otu na arụmọrụ dị mma nke njikọta. N'ime usoro a, nkwụsi ike njikọta bụ ihe dị oke mkpa, yabụ, ekwesịrị ịkwalite nkwụsi ike nke colloidal mgbe ị na -emepụta LFA. nkwụsi ike nke colloidal dị ezigbo mkpa maka nnwale mpụta mpụta ya na ya mere, mgbe ị na -echepụta ma na -emezi LFA, a na -echekwa ya mgbe niile. Nanoparticles ọla edo nke na -arụ ọrụ dị oke mkpa na njikọta na LFA nwere njirimara ngwa anya pụrụ iche site n'enyemaka nke ha na -amịkọrọ ma na -agbasasị ọkụ n'ụzọ ziri ezi na ịdị irè. Mmekọrịta siri ike dị n'etiti nanoparticles na ọkụ na -eme n'ihi elektrọnị na -eduzi nke dị n'elu igwe nke na -ebute oscillation mkpokọta mgbe elektrọnik na -enwe obi ụtọ site n'ìhè na otu ugboro. Mgbe enwere conjugation na-aga nke ọma enwere mmetụta ụfọdụ na njiri mara anya ka a na-ahụ mgbanwe ahụ na ndegharị ntụgharị nke enwere ike ị nwetakwu ya na ụdịdị UV-vis site na ọdịiche nke ahịrị uhie. Ọzọkwa maka ọgwụgwọ nke pad conjugation, enwere ike ịnwe ụzọ dị iche iche. Ụfọdụ n'ime ha na -emikpu n'ime mmiri, ma ọ bụ na -agbachapụ agbacha agbacha site n'enyemaka nke igwe mgbasa ozi akpaaka.
Mgbe nke a gasị, usoro nhọpụta nlele ga -apụta. Nke a bụ akụkụ mbụ nke ngwa ahụ mpụta mmiri ya mere, ọ dị mkpa ịlele ihe nlele mbadamba ihe na ọgwụgwọ tupu mpe mpe akwa nlele ka ọ na-aga na ịdị irè. Mpekere nlele ndị e ji eme nnwale mpụta mpụta dị n'ụdị dị iche iche dịka eriri, owu, sịntetik, wdg. A hụkwara na ụfọdụ f ihe nlele dị ka mmamịrị, ọbara, wdg nwere ike ịdị iche n'ihi ọtụtụ ihe ndị ọzọ gunyere ihe ndị dị ndụ, oge nri, ihe ọ drinkụ takenụ a na -a beforeụ tupu nchịkọta nke nlele na ngwaọrụ nnwale mpụta, na ọtụtụ ndị ọzọ. Maka ịgwọ mpe mpe mpe mpe mpe mpe mpe mpe akwa nwere ike iji nke nwekwara ọtụtụ uru. Mgbe ị na -emepe nnwale nnwale mpụta, yana ịhọrọ akara nlele, ihe na -echekwa ootmized nwere ike inye aka kwalite arụmọrụ nke nnwale site na ibelata mgbanwe nke nlele nke gụnyere protein, pH, viscosity, itinye nnu, wdg. nkwanye na nnwale nke nnwale ahụ mgbe a na -emepe ya. Egosipụtala ihe na -enye ọgwụgwọ na ọ na -enyere aka nke ukwuu na ijigide mmiri na ịdị n'otu, na -emezi pH, na -arụ ọrụ dị ka ndị na -egbochi ihe site na njikọta protein, nnu, surfactants na ntinye ọ bụla kwesịrị ekwesị. Nkọwa kachasị mkpa nke ihe nlele nlele iji lelee bụ ikike ịmịkọrọ mmiri n'ihi na nke ahụ na -ekwu maka oke nlele maka ule.
Mgbe ahọpụtara mpe mpe akwa nlele, nhọrọ mpe mpe akwa ga -esote. Mpekere mgbochi ahụ na -enyere aka na usoro mgbasa ozi nke reagents nke ejighi ahịrị abụọ wee banye ya bụ ahịrị ule na ahịrị njikwa. Mpekere mgbochi ahụ na -akwụsịkwa azụ azụ mmiri nke ejiri dị ka nlele. A na -atụ aro na ka ị na -ahọrọ ihe maka mpe mpe akwa, a ga -enyocharịrị ihe ahụ iji chekwaa ngwaọrụ ahụ na nghọtahie ọ bụla nwere ike ibute nsogbu yana ikekwe nsonaazụ ụgha. Ndị ọzọ karịa nke nkịtị, ihe gbara ọkpụrụkpụ ma ọ bụ wicking pad adịghị mma karịa ihe dị gịrịgịrị. Ihe dị gịrịgịrị dị mma n'ịrụ ọrụ nke ọma ma na -enwekarị ihe nwere ikike dị elu mgbe ụfọdụ. Mana ekwesịrị ka enyocha ihe ọ bụla maka njiri mara ya na ịdị mma ha maka mmepe nnwale nnwale mpụta. Maka ịhọrọ nha na ihe nke mpe mpe akwa a chọrọ ka edobe ya na ihe na -eme ka ikike ịmịkọrọ ga -adị elu yana oke nchekwa ga -agba ọsọ.
Na nnwale nnwale mpụta, mpe mpe mpe akwa wara wara bụkwa ntụzịaka nke ntuziaka mmepe ya. Na nzukọ ule warara, a na-achịkọta LFA dabere na nnukwu nrụpụta ma ọ bụ obere nrụpụta. Maka ụfọdụ ụdị nnwale nnwale mpụta, ọnụọgụ ọgụgụ nwere ike ọ gaghị abụ ihe achọrọ kama a ga-achọ usoro itinye akara maka ịme mgbakọ ule warara na LFA. Enwere cassette nke nwere ule warara n'ime bụ otu n'ime usoro dị oke mkpa na nke dị oke mkpa iji nweta nnwale nke a na -emepụtagharị ma bụrụkwa nke a pụrụ ịtụkwasị obi. Nkọwa abụọ a kpọtụrụ aha na mbụ dị oke mkpa maka ule ọnụọgụ, ọkachasị. Isi ọrụ kaseti ahụ bụ inye nrụgide chọrọ mmiri ahụ. Nke a bụ iji hụ na ọ na -aga nke ọma na mmiri ahụ na -agabigakwa na mgbakọ n'otu mmụba. Kaseti ahụ na -ahụkwa na mmiri mmiri ahụ anaghị anọgide na -apụta na nsọtụ ya ma na -asọba na mpe mpe akwa.
Mgbe mgbakọ ule warara ahụ gasịrị, nzọụkwụ ọzọ na -eme nyocha ahụ. Enwere usoro dị iche iche maka ịme nnwale ahụ dịka nnwale nnwale na conjugate mmiri mmiri, nyocha zuru oke maka conjugate akpọnwụwo, na ihe na -agba ọsọ. Maka nyocha nke warara ahụ, a ga -amatarịrị na ma nnwale ahụ ọ bụ nke ọma ma ọ bụ buru oke ibu na ekwesịrị ịhọrọ usoro nyocha ziri ezi. Iji nyochaa nnwale ahụ, enwere ike ịme ya site na anya gba ọtọ nke a ga -enwe ee/enweghị nsonaazụ ma ọ bụ site na ị nweta echiche nke ahịrị nnwale, enwere ike iji nyocha nyocha ma ọ bụ igwefoto nwere ọkụ na -achịkwa. Nzọụkwụ ikpeazụ bụ njikarịcha nke nnwale nke ịhọrọ ụdị mgbochi mgbochi kwesịrị ekwesị, akpụkpọ ahụ nitrocellulose, wick pad, adsorbent pad, na akụkụ ndị ọzọ niile.
mmechi:
The ntuziaka mmepe nke Lateral Flow Assay bụ ụzọ itoolu ruo iri nke enyere nke a ga -esorịrị nke ọma maka imepụta nyocha mpụta n'akụkụ.
References
https://cdn.shopify.com/s/files/1/0257/8237/files/BioReady_Lateral_Flow_Handbook.pdf
