Apa sing Nggawe Antibodi Tetep Kasedhiya Aliran Belakang Membran Nitrocellulose?
Membran Nitroselulosa ing Uji Aliran Lateral dumadi sawise sampel lan bantalan konjugat. Membran nitroselulosa uga diarani membran substrat lan minangka salah sawijining bagean sing paling penting lan sensitif marang asil tes sing ditindakake ing Uji Aliran Lateral . Ing Uji Aliran Lateral, bisa uga ana macem-macem bahan sing digunakake kayata selulosa asetat, polivinilidena fluorida (PVDF), nilon sing dimodifikasi muatan, lan polietersulfon (PES), lan liya-liyane. Ing membran Nitroselulosa, ana ukuran pori, porositas, kekandelan, lan perawatan kimia sing beda . Membran nitroselulosa ora duwe distribusi pori sing padha, mula wektu aliran kapiler luwih disenengi. Sadurunge pindhah luwih lanjut menyang penalaran, penting kanggo ngerti babagan aliran kapiler. Sejatine, wektu aliran kapiler diukur ing detik utawa sentimeter lan iku total wektu sing dibutuhake sampel kanggo diisi kanthi lengkap ing strip tes utawa Piranti Uji Aliran Lateral.
Membran nitrocellulose minangka awak operator kanggo antibodi ing piranti tes aliran lateral. Iki uga digunakake kanggo nyaring macem-macem proses lan jinis antibodi yaiku monoklonal lan kedadeyan kasebut minangka asil saka modhisi enzimmoimmounoassay.
Ing membran nitroselulosa , antibodi tetep lan konjugasi karo partikel biologis, yaiku lateks utawa partikel emas. Antibodi ora diidini obah lan ora obah ing membran nitroselulosa amarga macem-macem alasan. Amarga ana garis tes lan garis kontrol ing uji aliran lateral, antibodi macet ing antarane rong garis kasebut. Ngelingi garis tes, iki digunakake kanggo ngiket protein sampel dene garis kontrol duwe antibodi spesifik spesies sing digunakake kanggo ndeteksi antibodi ing sampel luwih lanjut. Alesan liyane kenapa antibodi tetep ing membran nitroselulosa yaiku ukuran pori film pendukung. Film pendukung non-pori saka membran nitroselulosa ora ngidini antibodi geser, nanging ditangani kanthi rapet lan kanthi mangkono tetep ing membran. Iki uga mbantu nyuda variabilitas.
Faktor penting liyane sing ndadekake antibodi tetep ana ing membran nitroselulosa yaiku pilihan pengencer antibodi, cara pangatusan, konsentrasi antibodi penangkap, lan tingkat pemberian reagen. Pangatusan sing tepat dibutuhake kanggo mesthekake yen antibodi penangkap bisa nempel ing membran; nanging, membran sing didhukung mbutuhake wektu sing luwih suwe kanggo garing dibandhingake karo membran sing ora didhukung. Saliyane kerumitan, kekhawatiran pangguna, persiapan sampel, pangopènan, reproduksibilitas, lan interpretasi asil sing gampang digunakake, kudu tansah dipastikake yen deteksi parameter sing ditemtokake sensitif. Sawetara standar kasebut, kayata interpretasi asil lan sensitivitas, banget disebabake dening imobilisasi agen deteksi lan retensi spasial karo parameter area pengujian.
Cara liya sing migunani kanggo nggawe antibodi tetep ana ing membran nitrocellulose yaiku lampiran kovalen antibodi menyang membran Assay Flow lateral. Uga, immobilisasi antibodi non-kovalen ing membran nitrocellulose LFA diwenehi kapasitas membran nitroselulosa sing kuwat banget ing antibodi naleni. Kaya sing kasebut ing ndhuwur, yen ing Assay Flow lateral ana partikel sing sensitif lan penting banget kanggo tes sampel kasebut. Ngubungake iki karo partikel emas koloid, dheweke wis mbuktekake manawa antigen tetep ana ing membran selulosa. Ing proses iki, langkah pertama yaiku adsorpsi pasif antibodi sing dibutuhake ing permukaan nanopartikel koloid emas. Iki minangka salah sawijining tantangan paling angel ing Assay Flow lateral. Kanggo tujuan kasebut, partikel konjugasi digawe kanthi gampang supaya antibodi, molekul lan unsur liyane tetep ana ing membran nitrocellulose.
Iki uga nawakake lampiran lan lapisan antibodi sing gampang ing permukaan kalebu analisis liyane lan uga biomolekul. Kajaba iku, manik-manik lateks ing tes aliran lateral uga migunani kanggo nggawe antibodi tetep ana ing membran nitrocellulose. Kajaba iku, konjugasi pasif uga bisa mbantu nggawe antibodi tetep ing membran nitrocelluse saka tes tes aliran lateral. Sanajan proses kasebut nyebabake lan nyebabake antibodi tetep ana ing membran nitrocellulose saka Flow Assay, bisa uga butuh wektu lan proses sing dawa banget Ora mung iki, nanging mbutuhake peralatan gedhe lan prekara liyane sing ndadekake hectic lan banget larang regane Uga, sawetara panyebabe mbutuhake optimalisasi aktif ing pH lan iki minangka prekara ekstensif, mula, metodologi lan proses anyar wis dilebokake ing piranti Assay Flow lateral sing nyebabake panggunaan metode liyane. Saperangan antibodi khusus ora bisa bergerak ing nitrocellulose kanthi nyerep fisik. Kanthi riset sing jero, antibodi uga bisa tetep ana ing membran nitrocellulose amarga ana interaksi hidrofobik lan dipolar tartamtu ing antarane loro domain protein lan nitrocellulose, sing nyebabake konservasi orientasi antibodi.
kesimpulan
Kanggo nyimpulake lan ngringkes adhedhasar katrangan ing ndhuwur, nitroselulosa minangka bagean penting saka uji aliran lateral lan piranti sing digunakake kanggo pengujian. Salah sawijining faktor sing paling penting lan penting sing nemtokake Uji Aliran Lateral lan sensitivitase yaiku Membran Substrat utawa Membran Nitkoselulosa . Garis tes lan kontrol digambar ing ndhuwur membran kanggo njamin pengikatan lan penangkapan antibodi sing apik. Adsorpsi non-spesifik ing garis tes lan kontrol bisa mengaruhi sensitivitas asil, sing nyebabake nilai asil sing salah. Amarga nitroselulosa minangka salah sawijining bagean saka uji aliran lateral saka ngendi sampel kasebut dilewati. Saka sampel, antibodi lan bagean antigenik saka sampel lan piranti kasebut konjugasi karo siji liyane lan nerusake menyang bagean sabanjure. Saka ing kono, sampel mili menyang membran nitroselulosa sing banjur njupuk antibodi lan antigen sing dibutuhake kanggo pengujian. Sifat lan alesan sing ndadekake antigen tetep ana ing membran nitroselulosa wis diterangake kanthi rinci ing ndhuwur saengga nutupi subyek makalah kasebut.
Cathetan Suku
https://www.creative-diagnostics.com/Immunochromatography-guide.htm
https://fnkprddata.blob.core.windows.net/domestic/download/pdf/IBS_A_guide_to_lateral_flow_immunoassays.pdf
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6350463/
https://www.bakerlab.org/wp-content/uploads/2015/12/Holstien_Anal_Bioanal_Chem_2015.pdf
https://www.nature.com/articles/s41598-021-87072-7
https://www.researchgate.net/topic/Nitrocellulose