Apa sing Nggawe Antibodi Tetep Kasedhiya Aliran Belakang Membran Nitrocellulose?
Membran Nitrocellulose ing Aliran Sisih Assay sawise sampel lan pad konjugat. Membran nitrocellulose uga diarani membran substrat lan minangka salah sawijining bagean sing paling penting lan sensitif tumrap asil tes sing ditindakake ing Assay Aliran Sisih. Ing Assal Flow lateral, bisa uga ana macem-macem bahan sing digunakake kayata selulosa asetat, polivinilidida fluorida (PVDF), nilon modifikasi, lan polyethersulfone (PES), lsp. Ing membran Nitrocellulose, ana macem-macem ukuran pori, porositas, kekandelan , lan perawatan kimia. Membran nitroselulosa ora duwe distribusi pori-pori sing padha mula wektu aliran kapiler luwih disenengi. Sadurunge pindhah menyang pertimbangan, sampeyan kudu ngerti babagan aliran kapiler. Sejatine, wektu aliran kapiler diukur ing detik utawa sentimeter lan minangka wektu total sing dibutuhake sampel kanggo diisi lengkap ing strip test utawa Alat Assay Flow lateral.
Membran nitrocellulose minangka awak operator kanggo antibodi ing piranti tes aliran lateral. Iki uga digunakake kanggo nyaring macem-macem proses lan jinis antibodi yaiku monoklonal lan kedadeyan kasebut minangka asil saka modhisi enzimmoimmounoassay.
Ing membran nitrocellulose, antibodi tetep lan konjugat karo partikel biologis yaiku partikel lateks utawa emas. Antibodi ora diidini obah lan ora bisa obah ing membran nitroselulosa amarga macem-macem sebab. Amarga ana garis test lan garis kontrol ing tes aliran lateral, antibodi macet ing antarane rong garis kasebut. Ngelingi garis tes, digunakake kanggo ngiket conto protein, dene garis kontrol duwe antibodi spesifik spesies sing digunakake kanggo ndeteksi antibodi luwih akeh ing sampel kasebut. Alasan liya manawa antibodi tetep ana ing membran nitrocellulose yaiku ukuran pori film backing. Film mburi non-keropos saka membran nitrocellulose ora ngidini antibodi bisa geser, luwih becik ditangani lan tetep ing membran. Iki uga mbantu nyuda variasi.
Faktor penting liyane sing ndadekake antibodi tetep ana ing membran nitroselulosa yaiku pilihan pengencer antibodi, cara pangatusan, konsentrasi antibodi penangkap, lan tingkat pemberian reagen. Pangatusan sing tepat dibutuhake kanggo mesthekake yen antibodi penangkap bisa nempel ing membran; nanging, membran sing didhukung mbutuhake wektu sing luwih suwe kanggo garing dibandhingake karo membran sing ora didhukung. Saliyane kerumitan, kekhawatiran pangguna, persiapan sampel, pangopènan, reproduksibilitas, lan interpretasi asil sing gampang digunakake, kudu tansah dipastikake yen deteksi parameter sing ditemtokake sensitif. Sawetara standar kasebut, kayata interpretasi asil lan sensitivitas, banget disebabake dening imobilisasi agen deteksi lan retensi spasial karo parameter area pengujian.
Cara liya sing migunani kanggo nggawe antibodi tetep ana ing membran nitrocellulose yaiku lampiran kovalen antibodi menyang membran Assay Flow lateral. Uga, immobilisasi antibodi non-kovalen ing membran nitrocellulose LFA diwenehi kapasitas membran nitroselulosa sing kuwat banget ing antibodi naleni. Kaya sing kasebut ing ndhuwur, yen ing Assay Flow lateral ana partikel sing sensitif lan penting banget kanggo tes sampel kasebut. Ngubungake iki karo partikel emas koloid, dheweke wis mbuktekake manawa antigen tetep ana ing membran selulosa. Ing proses iki, langkah pertama yaiku adsorpsi pasif antibodi sing dibutuhake ing permukaan nanopartikel koloid emas. Iki minangka salah sawijining tantangan paling angel ing Assay Flow lateral. Kanggo tujuan kasebut, partikel konjugasi digawe kanthi gampang supaya antibodi, molekul lan unsur liyane tetep ana ing membran nitrocellulose.
Iki uga nawakake lampiran lan lapisan antibodi sing gampang ing permukaan kalebu analisis liyane lan uga biomolekul. Kajaba iku, manik-manik lateks ing tes aliran lateral uga migunani kanggo nggawe antibodi tetep ana ing membran nitrocellulose. Kajaba iku, konjugasi pasif uga bisa mbantu nggawe antibodi tetep ing membran nitrocelluse saka tes tes aliran lateral. Sanajan proses kasebut nyebabake lan nyebabake antibodi tetep ana ing membran nitrocellulose saka Flow Assay, bisa uga butuh wektu lan proses sing dawa banget Ora mung iki, nanging mbutuhake peralatan gedhe lan prekara liyane sing ndadekake hectic lan banget larang regane Uga, sawetara panyebabe mbutuhake optimalisasi aktif ing pH lan iki minangka prekara ekstensif, mula, metodologi lan proses anyar wis dilebokake ing piranti Assay Flow lateral sing nyebabake panggunaan metode liyane. Saperangan antibodi khusus ora bisa bergerak ing nitrocellulose kanthi nyerep fisik. Kanthi riset sing jero, antibodi uga bisa tetep ana ing membran nitrocellulose amarga ana interaksi hidrofobik lan dipolar tartamtu ing antarane loro domain protein lan nitrocellulose, sing nyebabake konservasi orientasi antibodi.
kesimpulan
Kanggo nyimpulake lan ngringkes miturut katrangan ing ndhuwur, nitrocellulose minangka bagean penting saka tes aliran lateral lan piranti sing digunakake kanggo tes. Salah sawijining faktor sing paling penting lan penting sing nemtokake Asai Mengkil Sisih lan sensitivitas yaiku Membran Substrat utawa Membrane Nitcocellulose. Jalur tes lan kontrol digambar liwat membran kanggo mesthekake naleni lan nyekel antibodi sing apik. Adsorpsi non-spesifik ing baris test lan kontrol bisa mengaruhi sensitivitas asil, nyebabake angka asil sing salah. Minangka nitrocellulose minangka salah sawijining bagean saka tes aliran lateral sing sampel kasebut dilewati. Saka sampel, antibodi lan bagean antigen saka conto lan piranti kasebut saling konjugasi lan diterusake menyang bagean sabanjure. Saka kana, sampel kasebut mili menyang membran nitrocellulose sing akibate njupuk antibodi lan antigen sing dibutuhake kanggo tes kasebut. Sifat-sifat lan sebab-sebab sing nyebabake tetep antigen ing membran nitrocellulose wis diterangake kanthi rinci ing ndhuwur saéngga nutupi prakara makalah kasebut.
Cathetan Suku
https://www.creative-diagnostics.com/Immunochromatography-guide.htm
https://fnkprddata.blob.core.windows.net/domestic/download/pdf/IBS_A_guide_to_lateral_flow_immunoassays.pdf
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6350463/
https://www.bakerlab.org/wp-content/uploads/2015/12/Holstien_Anal_Bioanal_Chem_2015.pdf
https://www.nature.com/articles/s41598-021-87072-7
https://www.researchgate.net/topic/Nitrocellulose