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측면 흐름 개발

항체가 니트로셀룰로오스 막 측면 흐름 분석에 머무르게 하는 이유는 무엇입니까?

Poted on 23월 2021일, XNUMX년 by 측류 

니트로셀룰로오스 막 에서 측면 흐름 분석은 샘플 및 접합체 패드 다음에 옵니다. 니트로셀룰로오스 멤브레인은 기질 멤브레인이라고도 하며, 테스트 결과에 가장 중요하고 민감한 부분 중 하나입니다. 측면 흐름 분석. 측면 유동 분석에서는 셀룰로오스 아세테이트, 폴리비닐리덴 플루오라이드(PVDF), 전하 변형 나일론 및 폴리에테르설폰(PES) 등과 같은 다양한 재료가 사용될 수 있습니다. 니트로셀룰로오스 멤브레인에는 다양한 기공 크기, 다공성, 두께가 있습니다. , 그리고 화학 처리. 니트로셀룰로오스 막은 공극의 균일한 분포가 없으므로 모세관 흐름 시간이 더 바람직합니다. 추론으로 더 이동하기 전에 모세관 흐름에 대해 아는 것이 중요합니다. 기본적으로 모세관 흐름 시간은 초 또는 센티미터로 측정되며 샘플이 테스트 스트립 또는 측면 흐름 분석 장치에 완전히 채워지는 데 걸린 총 시간입니다.

니트로셀룰로오스 막은 측면 흐름 분석 장치에서 항체의 운반체 역할을 합니다. 이들은 또한 다양한 과정 및 항체 유형, 즉 단일클론을 스크리닝할 목적으로 사용되며 이는 효소면역분석법의 변형 결과로 발생합니다.

니트로셀룰로오스-막
니트로셀룰로오스-막

니트로셀룰로오스 막, 항체는 라텍스 또는 금 입자 중 하나의 생물학적 입자와 결합하고 유지됩니다. 항체는 여러 가지 이유로 인해 니트로셀룰로오스 막에 움직이지 못하고 고정됩니다. 측방유동검사에는 검사선과 대조선이 있기 때문에 항체가 이 두 줄 사이에 끼어 있습니다. 테스트 라인을 고려하면 샘플 단백질에 결합하는 데 사용되는 반면 컨트롤 라인에는 샘플에서 항체를 추가로 감지하는 데 사용되는 종 특이적 항체가 있습니다. 항체가 니트로셀룰로오스 막에 머무르는 또 다른 이유는 지지 필름의 기공 크기입니다. 니트로셀룰로스 막의 비다공성 지지 필름은 항체가 미끄러지는 것을 허용하지 않고 오히려 단단히 처리되어 막에 머무릅니다. 이것은 또한 변동성을 줄이는 데 도움이 됩니다.

항체가 니트로셀룰로오스 막에 머무르게 하는 다른 중요한 요소는 항체 희석제의 선택, 건조 방법, 포획 항체의 농도 및 시약 분배 속도입니다. 포획 항체가 멤브레인에 패치되도록 하려면 적절한 건조가 필요합니다. 그럼에도 불구하고, 지지된 막은 지지되지 않은 막에 비해 건조하는 데 상당히 많은 시간이 걸립니다. 복잡성, 사용자 우려, 샘플 준비, 유지 관리, 재현성 및 사용자 친화적인 결과 해석을 제외하고 항상 지정된 매개변수의 민감한 감지를 확인해야 합니다. 결과 해석 및 민감도와 같은 이러한 표준 중 일부는 테스트 영역의 매개변수와 함께 탐지 에이전트의 고정 및 공간 유지에 크게 기인합니다.

항체가 니트로셀룰로오스 막에 머물도록 하는 데 도움이 되는 또 다른 방법은 측면 흐름 분석의 막에 대한 항체의 공유 부착입니다. 또한, LFA의 니트로셀룰로오스 막에 대한 항체의 비공유 고정화는 항체를 결합하는 니트로셀룰로오스 막의 매우 강력한 능력을 암시합니다. 앞서 언급했듯이 측면 흐름 분석에는 샘플 테스트에 민감하고 중요한 입자가 있습니다. 이것을 콜로이드성 금 입자와 연결하여 항원이 셀룰로오스 막에 머물게 하는 것으로 입증되었습니다. 이 과정에서 첫 번째 단계는 금 콜로이드의 나노입자 표면에 필요한 항체의 수동적 흡착이다. 이것은 측면 흐름 분석에서 가장 어려운 것 중 하나입니다. 이를 위해 항체, 분자 및 기타 요소가 니트로셀룰로오스 막에 쉽게 머물도록 하는 접합 입자가 만들어졌습니다.

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이것은 또한 다른 분석 물질과 심지어 생체 분자를 포함한 표면에 항체를 쉽게 부착하고 코팅할 수 있습니다. 측면 유동 분석의 라텍스 비드는 니트로셀룰로스 막에 항체를 유지하는 데에도 도움이 됩니다. 또한, 수동적 접합은 측면 유동 분석 검사의 니트로셀룰로스 막에 항체가 머물도록 하는 데도 도움이 될 수 있습니다. 이러한 과정과 원인으로 인해 Lateral Flow Assay의 니트로셀룰로오스 막에 항체가 남게 될 수 있지만 시간이 오래 걸리고 과정이 매우 오래 걸립니다. 비싸다. 또한 일부 원인에는 pH의 적극적인 최적화가 필요하며 이는 광범위한 일이므로 새로운 방법론과 프로세스가 측면 흐름 분석 장치에 통합되어 다른 방법을 사용하게 되었습니다. 두 개의 항체는 물리적 흡수에 의해 니트로셀룰로오스에 특이적으로 고정됩니다. 연구에 뿌리를 둔 항체는 단백질 도메인과 니트로셀룰로오스 사이의 특정 소수성 및 쌍극자 상호작용으로 인해 니트로셀룰로오스 막에 머무를 수 있으며, 이는 항체의 방향을 보존하게 합니다.

결론

위의 설명에 비추어 결론을 내리고 요약하자면 니트로셀룰로오스는 측방 유동 분석의 중요한 부분이며 테스트에 사용되는 장치입니다. Lateral Flow Assay와 민감도를 결정하는 가장 중요하고 중요한 요소 중 하나는 Substrate Membrane 또는 니트코셀룰로오스 멤브레인. 항체의 우수한 결합 및 포획을 보장하기 위해 테스트 및 제어 라인이 멤브레인 위에 그려집니다. 테스트 및 제어 라인의 비특이적 흡착은 결과의 감도에 영향을 주어 잘못된 결과 값을 초래할 수 있습니다. 니트로셀룰로오스는 샘플이 통과하는 측면 유동 분석의 일부입니다. 샘플에서 샘플과 장치의 항체와 항원 부분이 서로 접합되어 다음 부분으로 전달됩니다. 거기에서 샘플은 결과적으로 테스트에 필요한 항체와 항원을 받아들이는 니트로셀룰로오스 막으로 흐릅니다. 니트로셀룰로오스 막에 항원이 머무르는 성질과 이유는 위에서 자세히 설명하였으므로 논문의 주제를 다룹니다.

참조
https://www.creative-diagnostics.com/Immunochromatography-guide.htm
https://fnkprddata.blob.core.windows.net/domestic/download/pdf/IBS_A_guide_to_lateral_flow_immunoassays.pdf
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6350463/
https://www.bakerlab.org/wp-content/uploads/2015/12/Holstien_Anal_Bioanal_Chem_2015.pdf
https://www.nature.com/articles/s41598-021-87072-7
https://www.researchgate.net/topic/Nitrocellulose

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