на страничен проток анализа (LFA) е добро воспоставена платформа за тестирање по точка на нега (POC) и причината е нејзината ниска цена и леснотијата на користење, Конвенционалните LFA даваат квалитативни или полу-квантитативни резултати и бараат употреба на специјализирани инструменти за квантитативно откривање . На анализа на страничен проток (LFA) е платформа базирана на хартија за откривање и квантифицирање на аналити во комплексни мешавини. Примерокот е поставен на тест уред, а резултатите се прикажуваат во рок од 5-30 минути. Поради ниските трошоци за развој и леснотијата на производство на LFA, нивните апликации се проширија на широк спектар на области кои бараат брзо тестирање.
Течен примерок, како што се крв, серум, плазма, урина, плунка или растворени цврсти материи, се додава директно во подлогата за примерок и е злобен преку уредот за страничен проток што треба да се користи. Подлогата за примерок го неутрализира примерокот и ги филтрира непожелните честички како црвените крвни клетки. Потоа, примерокот може слободно да тече кон конјугатната подлога, која содржи високо обоени или флуоресцентни наночестички со антитело на нивната површина. Овие исушени наночестички се ослободуваат и се мешаат со примерокот кога течноста ќе достигне конјугатната подлога. Ако антителото препознае какви било аналити во примерокот, тие ќе се врзат за антителото.
Има зголемување на побарувачката за точка на грижа повеќе дијагностички анализи со широки линии за тестирање кои овозможуваат брзо и истовремено откривање на повеќе аналити примероци на точка на нега во тековната историја. Таквите анализи (потенцијално единствено ЛФА) треба да бидат едноставни за спроведување без помош на лабораторија или лица обучени за хемиска анализа. ЛФА се одлични кандидати бидејќи се ефтини за производство, едноставни за употреба и што е најважно, широко прифатени од корисниците и регулаторните тела.
И покрај тоа што анализата на страничен проток е корисен и најкористен начин за тестирање, сепак има некои дефицити и проблеми што се гледаат во Анализата за страничен проток и резултатите, конкретно. Ова е често поставувано прашање зошто се појавуваат позитивни лажни резултати во анализата на страничен проток и има различни причини за тоа во зависност од гранката на науката. Сепак, причината што лажните позитивни резултати излегуваат во Анализата за страничен проток детално се дискутира во следниот одговор. Кога се забележува тест линија во целосен недостаток на посакуваниот аналит, лажно позитивен резултат може да биде предизвикан од различни фактори, вклучувајќи неспецифично врзување, вкрстена реактивност или хетерофилни антитела.
За да се оптимизира анализата и да се отстранат лажните позитивни резултати, потребно е да се идентификува кој од овие фактори или комбинации на фактори предизвикува лажно позитивен резултат. Неспецифичното врзување се јавува кога постои неспецифична интеракција помеѓу конјугатот на антитела-наночестички и антителата на тест-линијата, без оглед дали е присутен целниот аналит или не. Неспецифичното врзување често може да се избегне со едноставно оптимизирање на постапката на конјугација за специфичен протеин. Оптимизирање на оптеретувањето со антитела / протеини (премалку или премногу антитела може да резултираат во неспецифично врзување), времето на инкубација на антителата и тампонот на реакцијата се сите аспекти на оптимизацијата на конјугацијата. Протеини, сурфактанти или полимери можат да се користат како блокирачки агенси во компонента на тест лента (на пр. Конјугиран раствор за раствор, пред-третман на подлога за примерок, пред-третман на конјугирана подлога, пуфер за работа, итн.). Крос-реактивноста се разликува од неспецифичното врзување со тоа што се јавува кога антителото ќе се поврзе со аналитот во примерокот, кој НЕ е целниот аналит. Ова е потежок проблем за решавање и обично е неопходна замена на системите за антитела кои не реагираат вкрстено со несакани аналити.
Примерок што содржи хетерофилни антитела (ендогени антитела кои ги врзуваат анализните антитела) може да произведат лажно позитивен резултат. Неколку видови хетерофилни антитела може да завршат со вкрстено поврзување помеѓу антителото конјугирано со наночестичката и антителото на тест-линијата, дури и кога целниот аналит не е присутен. Ако лажниот позитивен резултат го покажува истиот интензитет на сигналот дури и по разредувањето на примерокот, наместо линеарно намалување на интензитетот на сигналот, тоа може да се должи на хетерофилни антитела. Човечки антитела во примерок кои комуницираат со анализа на антитела за да создадат лажно позитивни или лажно негативни резултати се нарекуваат хетерофилни антитела. Хетерофилното антитело може да се развие кај пациент како резултат на изложеност на специфични животни или производи од животинско потекло, инфекција со бактериски или вирусни агенси или неспецифично. Лажно-позитивен тест за резултат може да се појави за неколку точки на таа слаба техника за тестирање од страна на шкрилецот (на пример, густа размачка на хамокултската картичка) и неважечко читање на тестот. Одложеното читање исто така може да резултира со лажно-позитивен резултат, особено кога се користи тест за аглутинација на латекс. Лажно-позитивен резултат може да биде предизвикан и од физиолошка загуба на крв кај субјект кој не е во нормалниот опсег.
Лажно-позитивни резултати може да се појават како резултат на нарушувања на хомеостазата (на пример, нецелосна поправка на ексцизија, прекин на клеточниот циклус, воспаление) што може да се случи пред клеточни мембрани се компромитирани и некрозата / апоптозата се открива со хистопатологија. Овие последици можат да ја зголемат миграцијата на ДНК на местото на контакт, како и периферно во другите ткива, бидејќи ткивото реагира на клеточна повреда и напредува системскиот инфламаторен одговор, во зависност од концентрацијата на дозата и фреквенцијата на администрација.
на анализа на страничен проток е едноставен, лесен за пристап и економичен, но поради различни причини што се споменати погоре, резултатите понекогаш може да не се точни. Различните и исклучителни својства на ЛФА помогнаа во откривањето на биомаркерите на болеста и инфективните агенси во медицината, земјоделството, безбедноста на храната и безбедноста на животната средина. Иако принципот на методот успеал да остане непроменет со децении, техниките на LFA постојано се подобруваат, што резултира со зголемена чувствителност и репродуктивност, како и истовремено откривање на повеќе аналити. Важно е дека овие анализи сега можат да се вршат надвор од лабораторијата, што нуди значителни придобивки за употреба во земјите во развој и на местото на грижа, без оглед дали се на терен или во поконвенционални клинички услови. И покрај тоа што анализата на страничниот проток може да покаже лажни позитивни и обратно резултати, други методи може да се испробаат и тестираат за уверување.
Референци
https://www.clinisciences.com/en/read/serological-tests-in-mycology-1190/lateral-flow-assay-lfa-2095.html
https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0165993616300668
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4986465/
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
