Gids voor het oplossen van problemen met de laterale-flowassay
Laterale flowtesten zijn geavanceerde point-of-care testapparaten. Omdat ze technologisch geavanceerd zijn, bestaat de kans op problemen of defecten die de eindgebruikers in verwarring kunnen brengen. Voor het oplossen en analyseren van dergelijke problemen is het belangrijk om het probleemoplossingsproces van de laterale flowtest te kennen . Problemen met de laterale flowtest kunnen onder andere bestaan uit vals-positieve resultaten, valse valse resultaten, membraanproblemen en diverse andere problemen.
De handleiding voor het oplossen van problemen met de laterale flowtest is essentieel wanneer een gemelde fout is bevestigd. In de gemelde fout moet de fout in de laterale flowtest nauwkeurig worden beschreven, zodat er voldoende informatie beschikbaar is. Bovendien is het belangrijk om de frequentie van de fout te kennen, hoe vaak deze is voorgekomen en wat de waarschijnlijkheid is dat deze fout zich opnieuw voordoet.
In de handleiding voor probleemoplossing staan een aantal stappen beschreven die moeten worden gevolgd als er een probleem optreedt met de laterale flow assay (LFA) test en het bijbehorende apparaat. De eerste stap is het onderzoeken van de basisprincipes van de LFA. Hierbij moet de materiaalhistorie en de procesvariabiliteit van de LFA-test worden gecontroleerd. Ook eventuele ongebruikelijke waarnemingen tijdens de test kunnen helpen bij het vaststellen van het probleem. De tweede stap is het starten van de test met het reeds voltooide apparaat. Hiermee wordt bedoeld om het apparaat grondig te testen voordat het voor andere doeleinden wordt gebruikt. U moet de strips controleren en inspecteren. Bij het inspecteren van de strips moet u op een aantal zaken letten, zoals de consistentie van de assemblage van de assays, contaminatie in de LFA en eventuele fysieke schade aan het apparaat.
De volgende stap is het vervangen van de componenten waarvan bekend is dat ze werken in ruil voor de componenten die op dat moment niet werken. Voor dit doel moet u mogelijk naar de vorige sets apparaten zoeken als het gevonden probleem zich in het apparaat of een bepaald onderdeel van dat LFA-apparaat bevindt. Hetzelfde geldt in het geval van chemische of biologische elementen waarvan wordt gedacht dat ze de oorzaak van het probleem zijn, dan moeten ze worden vervangen door de vorige batch apparaten om dit probleem ook op te lossen.
De volgende stap die in dit proces komt, is het onderzoeken van de snelheid van de test. Voor het onderzoeken van de snelheid van de test kunt u gebruik maken van een half-stick test. Met behulp hiervan wordt het gemakkelijk om de problemen op te lossen, of het nu gaat om chemische componenten of biologische componenten. Door deze methode te gebruiken, kunnen de variaties van de geconjugeerde pads, monsterpads, behuizingen en de gerelateerde assemblageprocessen worden geëlimineerd. En het pluspunt is dat andere variabelen tegelijkertijd kunnen worden gecontroleerd.
Andere factoren die een rol spelen bij het oplossen van problemen met de laterale flow-assay zijn de leveranciers, de productie en kwaliteitscontrole, en de eindgebruikers van het product. Leveranciers zijn verantwoordelijk voor het consistent leveren van kwaliteit en het voldoen aan de specificaties die relevant zijn voor de laterale flow-assay. Bovendien moeten het productieproces en de kwaliteitscontrole worden gecontroleerd, aangezien dit de belangrijkste en fundamentele stap is naar de productie van apparaten van goede kwaliteit. Verbeterde training moet worden gegeven voor de verfijnde processen en de verbeterde kwaliteit van het product. Ten slotte moeten de bedieningsinstructies voor de eindgebruikers expliciet en duidelijk worden beschreven, zodat zij begrijpen hoe ze het apparaat op een verantwoorde manier moeten gebruiken.
Tijdens het gebruik van de laterale-flow-assay bestaat de mogelijkheid dat u vals-positieve resultaten ziet. Het fout-positieve resultaat treedt op wanneer de gewenste analyt in het monster of de matrix niet aanwezig is, maar de resultaten waren positief. Om dit probleem op te lossen is het belangrijk om de verschillende oorzaken erachter te begrijpen. De redenen kunnen niet-specifieke binding, heterofiele binding of zelfs kruisreactiviteit zijn. Om deze problemen op te lossen, moet de optimalisatie van de laterale stroomtest of het conjugatiekussen worden uitgevoerd. De bovengenoemde oorzaken zijn totaal verschillend van elkaar in termen van affiniteit, antigenen en antilichamen. Ook kan de aanwezigheid van heterofiele antilichamen leiden tot de binding van de antilichamen aan de niet-gerichte analyt, wat resulteert in valse resultaten. Als er in uw laterale-flow-assay heterofiele antilichamen zijn, kunt u het probleem oplossen door de heterofiele blokkerende reagentia aan te schaffen, of zelfs muis-IgG-conjugaat kan worden gebruikt om dit probleem van de laterale-flowassay op te lossen.
Een ander probleem dat kan worden gevonden in de laterale-flow-assay is de afname van de controle- en testlijn wanneer het monster of de matrix op het monsterkussen in het LFA-apparaat wordt geplaatst. Dit probleem is in een aantal gevallen waargenomen en de geïdentificeerde reden hiervoor is de verschillende elementen in de klinische matrix of het monster. Om dit probleem op te lossen, kan het gebruik van blokkerende middelen in het geconjugeerde verdunningsmiddel of het conjugatiekussen dit probleem helpen oplossen. Verschillende blokkerende middelen kunnen eiwitten, zout, moleculen of metabolieten zijn.
Conclusie:
Laterale flowtesten zijn wereldwijd de meest gebruikte apparaten. Er kunnen echter problemen optreden om verschillende redenen tijdens het gebruik van het apparaat. Deze handleiding voor het oplossen van problemen met de laterale flowtest laat zien wat er gedaan kan worden om het probleem te analyseren en op te lossen. Samenvattend is het belangrijk te benadrukken dat voor de effectieve productie van laterale flowtesten en teststrips een combinatie van biologische, chemische, fysische en technische factoren een rol speelt. Het is aan te raden en zelfs noodzakelijk om alle minimale factoren en aspecten in overweging te nemen tijdens de productie om variaties te minimaliseren die uiteindelijk tot onjuiste resultaten kunnen leiden. Een probleem met het nitrocellulosemembraan van de laterale flowtest kan bovendien te wijten zijn aan een ontwerpfout of een andere assemblagefout.
Referenties
https://www.emdmillipore.com/INTERSHOP/static/WFS/Merck-Site/-/Merck/en_US/Freestyle/DIV-Divisional/Events/pdfs/lateral-flow-presentations/troubleshooting-lateral-flow-tests.pdf
https://www.cytivalifesciences.com/en/us/solutions/lab-filtration/knowledge-center/lateral-flow-assay-troubleshooting-and-how-to-switch-membranes
https://nanocomposix.com/pages/lateral-flow-tips-tricks-and-frequently-asked-questions-faq#troubleshooting