Lateral Flow Assay Werkingsmechanisme Stap voor stap
Laterale stroom analyse, een apparaat- of striptest die wordt gebruikt om de aan- of afwezigheid van een analyt in het monster te bepalen, heeft een mechanisme dat tijdens het hele testproces wordt gevolgd. Het mechanisme zorgt voor de werking van de test, het uitvoeren van de procedure en het verkrijgen van de resultaten van de test. Om het feit toe te voegen, moet worden opgemerkt dat zelfs de technologie overal op medisch gebied is geweest en Laterale-flow-assays staan daar niet los van. Daarom is de technologie verwerkt in de Laterale stroomtest As maar hun werking of mechanisme blijft hetzelfde. En dit is een van de redenen dat dit het beste testapparaat is voor ontwikkelde en ontwikkelingslanden.
Om het mechanisme van de Laterale stroomtest As, hier is een kort overzicht van het mechanisme. Allereerst is er een monsterkussen waarop het monster wordt geladen en dat verder naar het geconjugeerde kussen gaat. Op het geconjugeerde kussentje vinden de bindingsgebeurtenissen plaats vanwege de aanwezigheid van detectiedeeltjes die goud of latex kunnen zijn. De volgende stap die optreedt, is dat het monster en het reactiemiddel binden en naar het reactiemembraan gaan. Het reactiemembraan helpt bij het produceren van resultaten. De testlijn stopt of blijft stromen tot het adsorberende kussen. Om te weten of de laterale-flow-assay werkte, binden de reactiemiddelen zich aan de controlelijn en produceren de resultaten. Het gedetailleerde mechanisme van de Lateral Flow Assay wordt hierna beschreven.
Voorbeeld Pad
Sample Pad is het begin van de laterale-flow-assaytest. De samenstelling van het monsteraanbrengkussen is glasvezel, geweven gaas of cellulose. Glasvezel, geweven gaas en cellulose hebben verschillende eigenschappen van elkaar. Ook zijn de werking en de kosten ervan afhankelijk van het type. Kortom, het monsteraanbrengkussen start de Lateral Flow Assay-test en de belangrijkste functie hiervan is om een gelijkmatige hoeveelheid van het monster of het monster te krijgen en deze te verdelen. Het is belangrijk dat het monsterkussentje het monster glad maakt, zodat het de scheiding van het monster, pH-aanpassing en binding gelijkmatig kan uitvoeren. Om de test te starten, moet het monster op het monsteraanbrengkussen worden gelegd.
Vervoeg Pad
Het conjugaatkussen is de tweede stap in het mechanisme van de laterale flow-assay. Het conjugaatvrijgavekussen bestaat uit niet-geweven glasvezels en bevat het reeds gedroogde detectiemiddel. Wanneer het monster verzadigd raakt en naar het monstervrijgavekussen stroomt, wordt het detectiemiddel vrijgegeven om het monster te analyseren. De belangrijkste functie van het conjugaatkussen is ervoor te zorgen dat het monster en het reactiemiddel naar het membraan worden getransporteerd, terwijl het conjugaat behouden blijft. In het conjugaatkussen moet er weinig niet-specifieke binding zijn om te voorkomen dat het detectiemiddel in het kussen blijft plakken.
Detectiereagens
Er is altijd het detectiereagens in de laterale stromingstest. Het detectiereagens heeft antilichamen die verder zijn geconjugeerd met de fluorescerende of gekleurde deeltjes. De effectiviteit van de laterale flow-assay is afhankelijk van de kwaliteit van de antilichamen en het detectiereagens.
antilichaam
De selectie van het antilichaam voor de laterale-flow-assay wordt als belangrijk beschouwd en er moeten weinig factoren in overweging worden genomen bij het selecteren van het antilichaam voor de laterale-flow-assay. De eerste factor is een betere toevoer van het antilichaam. Ten tweede moet de specificiteit van het antigeen worden gecontroleerd en gewaarborgd. Ook de keuze tussen de monoklonale of polyklonale middelen bij het maken van de keuze voor antistoffen. Monoklonalen worden aanbevolen vanwege het feit dat er een groot aantal antilichamen kan worden geproduceerd en zo helpt bij het identificeren van de enkele antigene epitoop, terwijl polycilonals het onderwerp kunnen worden van de variabiliteitsfactor en hun levering ook niet is gegarandeerd.
Nitcocellulose Membraan
Substraatmembraan of nitrocellulosemembraan is een van de belangrijkste en meest cruciale factoren bij het bepalen van de laterale-flow-assay en ook voor de gevoeligheid ervan. De testlijn en controlelijn worden over het membraan getrokken om te zorgen voor een goede binding om de antilichamen op te vangen. Niet-specifieke adsorptie op de testlijnen en controlelijnen kan de gevoeligheid van de resultaten beïnvloeden die valse resultaten kunnen opleveren.
Adsorberend Pad
Aan het einde van de strip of het laterale-flow-assay-apparaat wordt een adsorberend kussentje of een wicking-kussentje geplaatst. De doelpositie van het wicking pad kan een cellulosefilter hebben dat helpt bij het optimaliseren van de hoeveelheid monster in de teststrip. De belangrijkste functie van het adsorberende kussen is om de stroom van monstervloeistof over het nitrocellulosemembraan te regelen. Niet alleen dat, maar het stopt ook de achterwaartse stroom van het monster, waardoor de juiste hoeveelheid van het monster of monster behouden blijft.
Procesopties in het laterale-stroomassaymechanisme
Hoewel de stapsgewijze actie of het mechanisme tot in detail is uitgelegd, zijn de procesopties in de laterale stroomtest cruciaal. Er zijn twee procesopties; de ene is batchverwerking en de andere is in-line/reel-to-reel assemblage. Batchverwerking is ost-effectief en heeft personeel nodig, wat kan leiden tot variabiliteit in de resultaten, waardoor niet-betrouwbare resultaten worden verkregen. Terwijl assemblage van haspel tot haspel een machinaal verwerkte verwerkingsoptie is en betrouwbaarder voor grotere of bulkhoeveelheden. Tijdens beide soorten verwerkingsopties is het aspect van temperatuur erg belangrijk en moet het in overweging worden genomen om echte en gewenste resultaten op te leveren.
Conclusie
De Lateraal-stroomassaymechanisme bestaat uit enkele onderdelen, waaronder pads, membranen en enkele deeltjes die helpen om het monster te detecteren en resultaten te produceren. Ook al zijn er verschillende Lateral Flow Assay-apparaten en sommige zijn technologisch ingebouwd, andere niet, maar het mechanisme blijft hetzelfde. Alle factoren in het mechanisme van de laterale-flow-assay moeten als belangrijk worden beschouwd en mogen nooit over het hoofd worden gezien.
Referenties
https://www.creative-diagnostics.com/Immunochromatography-guide.htm
https://fnkprddata.blob.core.windows.net/domestic/download/pdf/IBS_A_guide_to_lateral_flow_immunoassays.pdf
https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/lateral-flow-test