پسرلي جریان عهد دا هغه وسیله ده چې په کور کې د ګړندي ازموینې او همدارنګه د کلینیکي ازموینې لپاره کارول کیږي. دا خورا معتبر او دقیق وسایل دي چې په نږدې هر پرمختللي او پرمختللي هیواد کې کارول کیږي. همدارنګه ، د ورپسې جریان اسای د پراختیا لارښود دې ته نږدې 10 مرحلې لري کوم چې د وروستي جریان پراساس پراختیا پروسه ټاکي. معمولا ، د فلو فلو اسیسز د نمونې پیډ ، کنجګیټ پیډ ، نایټروسیلوز جھلی ، لیبل اډسوربینټ پیډ ، او بفر ولرئ. په هرصورت ، ممکن په لیبلونو کې ځینې بدلونونه شتون ولري ځکه چې دلته مختلف لیبلونه شتون لري چې د ورپسې جریان تحلیلونو کې کارول کیږي.
د پیل لپاره د فلو فلو اسای پراختیا لارښود، دا مهمه ده چې د پروسې پیل کولو دمخه یو څو کړنو ته پام وکړئ. له هرڅه دمخه ، دا مهمه ده چې د ورستیو جریان تحلیل لپاره غوره شوي ب formatه تحلیل کړئ ایا دا به سیالي وي یا سینڈویچ ب .ه. اساسا ، د وروستي جریان پراساس پراختیا لارښود د تحلیل پراختیا پروسې پورې اړه لري. لومړی مهم او خورا مهم ګام د کنټرول تحلیل پیژندل دي چې په نمونه کې به د هدف تحلیل کونکي پیژندلو کې مرسته وکړي. دا د پراختیا لارښود به د LFA عمومي پراختیا پروسه ورکړي ځکه چې مختلف اسیسونه هم مختلف پروسې لري.
لومړي ګام ته د پرمختګ لارښود د نانو پارټیکلز انتخاب دی. د نانو پارټیکلز انتخاب په اندازې او شکل کې توپیر لري. د وروستي جریان اسیسونو لپاره مختلف اندازې شتون لري. دلته د 40nm سرو زرو نانو پارټیکلونه هم د کاربن یا سایټریټ سطحې سره راځي چې د پروټینونو جذبولو پروسې لپاره نور هم کارول کیدی شي. نور نانو پارټیکلز چې د LFA پراختیا لپاره غوره کیدی شي د کاربوکسیل سرو زرو ، کارباکسیل سرو زرو نانو شیلونو ، او داسې نورو څخه پرته نور تحقیقات هم شتون لري لکه د سیلولوز مالګې ، رنګ شوي پولیټیرین ، او فلوروسینټ تحقیقات. د کارباکسیل سرو زرو نانو پارټیکلونو غوره کولو نقطه دا ده چې د جذب پروسې لپاره خورا لږ انټي باډیز ته اړتیا وي او د دې نانو پارټیکلونو له امله یو بند رامینځته کیږي چې یو مستحکم او نه بدلیدونکی امیډ بانډ دی. په هرصورت ، دا باید په پام کې ونیول شي چې پایله لرونکي ځواکونه چې د نانو پارټیکلز او انټي باډیز ترمینځ موندل شوي د دوی د جوړه چاپیریال له امله دي.
دوهم ګام د انټي باډي انتخاب دی. د انټي باډي انتخاب یو مهم ګام دی ځکه چې د LFAs فعالیت د انټي باډیز ، کینیټیکس او نورو سټریک ملکیتونو تړاو پورې اړه لري. همچنان ، د انټي باډیز پابندول د پایلو کشف لپاره مهم دي. بل مهم فاکتور د انټي باډیز غوره کولو پرمهال د دوی دوه ډوله دي. دوه ډوله انټي باډي مونوکلونل او پولی کلونل دي. مونوکلونل انټي باډیز د تولید لپاره اسانه دي پداسې حال کې چې پولی کلونل انټي باډیز د مونوکلونل په پرتله نسبتا لوړ حساسیت لري. د انټي باډي انتخاب پروسې مرحله کې ، نور دوه مرحلې شتون لري لکه د انټي باډي پاکول ، او د کنټرول لاین انټي باډي. د انټي باډي انتخاب کې ، وړاندیز شوی ډډ د دې لپاره د انټي باډیز سکرین کول دي چې دوی باید دمخه ازمول شوي وي. انټي باډیز د وروستي جریان تحلیل خورا لومړني او لومړني نسخې په جوړولو سره سکرین او ازمول کیدی شي چې د ازموینې نمونې وسیلې په توګه کار کولی شي. د انټي باډیز فعالیت په مختلف ډول LFAs کې توپیر لري. د مثال په توګه ، په ELISA کې کینیټیکس خورا مهم ندي. او د وروستي جریان تحلیل په اړه خبرې کول ، ځینې ځانګړي شرایط شتون لري چې انټي باډیز باید د دې وړتیا ولري. له هرڅه دمخه ، انټي باډیز باید فعال وي حتی وروسته لدې چې دوی د نانو پارټیکلونو سره یوځای شوي وي او د دوی ساختماني بشپړتیا باید په هیڅ ډول زیان ونه رسوي. همچنان ، دوی باید د دې وړتیا ولري چې سمدستي خپل عکس العمل وړاندې کړي کله چې نمونه د نمونې لخوا بیا له سره اوبه کیږي. په نورو ډولونو اسیسونو کې د انکیوبیشن وخت د وروستي جریان پراساس په پرتله اوږد دی په کوم کې چې د ازموینې لاین سره تړل باید د څو ثانیو په موده کې ترسره شي.
پدې پروسه کې دریمه پروسه د نایټروسیلوز جھلی دی او دا د LFA خورا مهمه برخه ده ځکه چې دا د ازموینې او کنټرول لاینونه لري. د نایتروسیلولوز جھلی هم ریجینټونه لري چې د پایلو تولید لپاره کار کوي. دا په مختلف اندازو ، پورسوټي او ډیزاینونو کې شتون لري. په حقیقت کې ، د نایتروسیلولوز جھلی د کیپلیري جریان وخت پورې اړه لري. د کیپلیري جریان وخت سره ، دا پدې مانا ده چې د نمونې لپاره اړین وخت تر 4cm پورې جریان لري. پدې مرحله کې ، یو بل ګام شتون لري چې د جھلی پټولو په نوم یادیږي. هغه بفر چې پکې یو ځانګړی پروټین پټه وي کولی شي د هر اړخیز جریان تحلیل وروستي پایلو باندې د پام وړ اغیزه ولري. که څه هم ډیری پروټینونه په 1x PBS کې منحل کیدی شي ، ځینې یې د pH ، مالګې غلظت ، او د سټیبلیزر پیښې لپاره خورا حساس دي چې د دې لپاره ټریلوز نوم کیدی شي. د غشا لرې کول یو بل مهم ګام دی چې د دې مرحلې سره راځي. پدې مرحله کې ، د فلو فلو اسای ازموینې ډیزاین د ازموینې پټه کول او د انټي باډي لاینونو کنټرول کول دي چې د نایتروسیلولوز جھلی کې شتون لري. پدې مرحله کې یوه مهمه پاملرنه د نایتروسیلولوز جھلی دی چیرې چې ویل کیږي د نایتروسیلولوز جھلی په هغه ځای کې مه ساتئ چیرې چې رطوبت شتون نلري بلکه دا ټول وچ وي. د وروستي جریان تحلیل پراختیا لپاره ، د نایتروسیلولوز جھلی لپاره تودوخه باید رطوبت ولري. لکه څنګه چې د اسیس مختلف فارمیټونه شتون لري ، د بیلګې په توګه سیالي ب formatه او د سینڈوچ ب formatه چې خورا مهم هم دي. د انټي باډي غلظت په دواړو فارمیټونو کې د سانډویچ ب formatه کې توپیر لري د وړاندیز شوي انټي باډي غلظت یوازې 1mg/mL د ازموینې او کنټرول لاین انټي باډیز لپاره دی او دا حد له 0.5 څخه تر 2 mg/mL پورې کیدی شي. د نایتروسیلولوز جھلی مرحله او د ورپسې جریان پراختیا لارښود کې ، بل ګام پکې شامل د جھلی بندولو مرحله ده. د دې مرحلې ترسره کول ډیری ګټې لري لکه د مایع ښه جریان ، د ازموینې سټریپونو ثبات ، او د غیر مشخص پابند بندول پدې توګه ریښتینې پایلې ترلاسه کوي. په وروستي جریان تحلیل کې د ډیری نایتروسیلولوز جھلی لپاره ، یو ملکیتي حل شتون لري چې د غشا هایدروفیلیک جوړولو لپاره اضافه شوی.
بل ګام کونجګیټ او کنجګیټ پیډ دی. د وروستي جریان تحلیل رامینځته کولو لپاره دا مهم دي چې د مطابقت لرونکي پیرامیټونو رامینځته کول. کله چې یو کونجګیټ د وروستي جریان تحلیل لپاره چمتو کیږي دا توزیع کیږي او په کونجګیټ پیډ کې وچیږي. د انټي باډیز ثبات لرونکي یوځای کیدو رامینځته کولو لپاره ممکن څو مرحلې وي. هغه ګامونه چې د همغږۍ وده او پرمختللي موثریت رامینځته کولو کې دخیل دي. پدې مرحله کې ، د همغږۍ ثبات یو خورا مهم ګام دی او له همدې امله ، د LFA ډیزاین کولو پرمهال کولایډیډ ثبات باید مطلوب وي. د کلایډال ثبات د وروستي جریان تحلیل لپاره خورا اړین دی او له همدې امله د LFA ډیزاین او مطلوب کولو پرمهال دا تل په پام کې نیول کیږي. د سرو زرو نانو پارټیکلز چې په LFA کې یوځای کیدو کې مهم رول لوبوي خورا ځانګړي نظری ځانګړتیاوې لري د دې په مرسته چې دوی دقت او موثریت سره ر light ا جذبوي او خپروي. د نانو پارټیکلز او ر light ا ترمینځ قوي تعامل د ترانسپورت برقیانو له امله پیښیږي چې د فلزي سطحې کې شتون لري چې د ډله ایز تاوان لامل کیږي کله چې برقیان د ورته او مساوي فریکونسۍ سره د ر light ا لخوا هڅیږي. وروسته لدې چې یو بریالی یوځای کیدل شتون لري د نظری ځانګړتیاو باندې ځینې اغیزې شتون لري ځکه چې بدلون په انعکاس کونکي شاخص کې لیدل کیږي کوم چې د سرخ کرښې په توپیر سره د UV-vis سپیکٹرا کې نور هم موندل کیدی شي. همچنان د کنججریشن پیډ درملنې لپاره ، مختلف میتودونه کیدی شي. ځینې یې ډوبیدل دي ، یا د اتوماتیک ډسپینسر په مرسته په مساوي ډول سپریږي.
له دې وروسته ، د نمونې پیډ انتخاب پروسه واقع کیږي. دا د دې لومړۍ برخه ده پسرلي جریان پرله پسې دا اړینه ده چې د نمونې پیډ توکي چیک کړئ او د دې جریان او موثریت لپاره د نمونې پیډ دمخه درملنه. د ورپسې جریان تحلیلونو لپاره کارول شوي نمونې پیډونه مختلف ډولونه دي لکه فایبر ، پنبه ، مصنوعي ، او داسې نور دا هم لیدل شوي چې ځینې f نمونې لکه پیشاب ، وینه ، او نور د ډیری نورو فاکتورونو له امله توپیر کیدی شي کوم چې بیولوژیک فاکتورونه ، د خواړو وخت ، څښاک د ورپسې فلو اسای وسیلې کې د نمونې راټولولو دمخه اخیستل شوي ، او ډیری نور. د نمونې پیډ درملنې او د دې مطلوب کولو لپاره مطلوب بفر کارول کیدی شي کوم چې ډیری ګټې هم لري. پداسې حال کې چې د ورپسې جریان تحلیل رامینځته کول ، او د نمونې پیډ غوره کول د اوټ مایز بفر کولی شي د نمونې تغیر کمولو سره د تحلیل فعالیت لوړولو کې مرسته وکړي چې پکې پروټین ، pH ، ویسکوسیټي ، د مالګې غلظت ، او نور هم شامل کیدی شي. جریان او د تحلیل ثبات کله چې دا رامینځته کیږي. د درملنې بفر د جریان او ثبات ساتلو ، د pH نورمال کولو ، د هر یو مناسب غلظت سره د پروټینونو ، مالګو ، سرفیکټینټونو ترکیب سره د مخنیوي اجنټانو په توګه کار کولو کې خورا ګټور ثابت شوي. د چیک کولو لپاره د نمونې پیډ خورا مهم توضیح د جذب ظرفیت دی ځکه چې دا د ازموینې لپاره د نمونې حجم په اړه وایی.
وروسته لدې چې د نمونې پیډ غوره شي د ویک پیډ انتخاب بل راځي. د ویکینګ پیډ د ریجینټونو د جذب پروسې کې مرسته کوي کوم چې د کومې کرښې یعنی د ازموینې لاین او کنټرول لاینونو لخوا ندي نیول شوي. د ویکینګ پیډ د مایع شاته جریان هم بندوي چې د نمونې په توګه کارول کیږي. دا وړاندیز کیږي چې د ویکینګ پیډ لپاره د موادو غوره کولو پرمهال مواد باید چیک شي ترڅو وسیله له هرډول توپیرونو څخه وژغوري چې د مسلو لامل کیدی شي او شاید غلطې پایلې. د نورمال څخه پرته ، موټ مواد یا د ویکینګ پیډ د پتلي موادو څخه غوره ندي. پتلی مواد د غوره ترسره کولو لپاره غوره دي او معمولا ځینې وختونه د لوړ ظرفیت توکي لري. مګر هر توکي باید د هغې د ځانګړتیاو او د وروستي جریان تحلیل پراختیا لپاره د دوی مناسبیت لپاره چیک شي. د ویکینګ پیډ اندازې او موادو غوره کولو لپاره دا اړین دي چې دا د فاکتور سره په مطابقت کې وساتئ چې د جذب ظرفیت باید لوړ وي او د بفر حجم باید روان وي.
د پس منظر جریان کې ، د سټریپ ټیسټ مجلس هم د دې پراختیا لارښود مرحله ده. د سټریپ ټیسټ مجلس کې ، LFAs د لوی تولید یا کوچني کچې تولید پراساس راټول شوي. د ځینې فزيکي جریان تحلیلونو لپاره ، د کمیتي لوستل ممکن اړتیا نه وي مګر په LFA کې د سټریپ ټیسټ مجلس چلولو لپاره د ډپسټیک ب formatه ته اړتیا وي. دلته یوه کیسیټ شتون لري چې دننه د سټریپ ټیسټ لري د اسای ترلاسه کولو لپاره یو له خورا اړین او مهم ګامونو څخه دی چې د تولید وړ او هم د باور وړ دی. مخکې ذکر شوي دوه مشخصات د کمیتي ازموینو لپاره خورا مهم دي ، په ځانګړي توګه. د کیسیټ اصلي دنده مایع ته اړین فشار چمتو کول دي. دا د دې ډاډ ترلاسه کول دي چې مطلوب جریان شتون لري او مایع هم په ورته جریان کې د مجلس څخه تیریږي. کیسیټ دا هم ډاډه کوي چې مایع په څنډو کې پاتې نشي او یوازې په پیډونو کې جریان لري.
د سټریپ ټیسټ مجلس وروسته ، بل ګام د تحلیل پرمخ وړل دي. د آس پرمخ وړلو لپاره مختلف تخنیکونه شتون لري لکه د مایع کنجګیټ کې د ولسوالۍ پراساس ، د وچ شوي کنجګیټ لپاره بشپړ اسیسونه ، او د چلولو بفر. د پټې تحلیل لپاره ، دا باید وپیژندل شي چې ایا ازموینه کیفیتي یا کمیتي ده او د تحلیل سمه میتود باید غوره شي. د تحلیل تحلیل کولو لپاره ، دا یا د سترګې له لارې ترسره کیدی شي چیرې چې هو/نه پایلې وي یا د ازموینې لاین تاثیر په نیولو سره ، د فلیټ بیډ سکینر یا کیمره د کنټرول شوي ر light ا سره کارول کیدی شي. وروستی مرحله د تحلیل مطلوب کول دي په کوم کې چې د مناسب انټي باډي جوړه غوره کول ، د نایتروسیلولوز جھلی ، ویک پیډ ، اډسوربینټ پیډ ، او نورې ټولې برخې شاملې دي.
پایله:
د د وروستي جریان تحلیل پراختیا لارښود له نهو څخه تر لسو مرحلو چمتو شوی چې باید د ورپسې جریان تحلیل رامینځته کولو لپاره په بشپړ ډول تعقیب شي.
ماخذونه
https://cdn.shopify.com/s/files/1/0257/8237/files/BioReady_Lateral_Flow_Handbook.pdf