O que é um teste de ensaio de fluxo lateral?
Fluxo lateral ensaio (LFA) é um método diagnóstico renomado para testes pontuais (POC) e o motivo é seu baixo custo e facilidade de uso. Ensaio de Fluxo Lateral Os testes são utilizados para identificar biomarcadores em qualquer amostra de urina, saliva, sangue, plasma, etc., para fins de diagnóstico. Os testes de fluxo lateral (LFA) convencionais produzem resultados semiquantitativos ou qualitativos, o que exige o uso de instrumentos especializados para detectar resultados quantitativos. O LFA é um método de teste em papel para detectar e quantificar analitos em misturas complexas. A amostra é colocada em um dispositivo de teste e os resultados são apresentados em aproximadamente cinco a trinta minutos. As aplicações dos LFAs se expandiram para diversas áreas que exigem testes rápidos devido à sua relação custo-benefício e facilidade de fabricação.
As principais características do teste de ensaio de fluxo lateral são descritas a seguir. Em primeiro lugar, são descartáveis, o que significa que não podem ser usados repetidamente. Além disso, eles não são laváveis. Depois de usados, devem ser descartados. Em segundo lugar, eles são econômicos e, portanto, facilmente disponíveis e acessíveis. Terceiro, eles são robustos por natureza, o que significa que podem ser armazenados em temperatura ambiente e ter uma vida útil de vários anos.
Nos últimos tempos, tem havido um mercado crescente e a necessidade de múltiplos ensaios diagnósticos em pontos de atendimento com linhas de teste abrangentes que permitem a detecção rápida e simultânea de vários analitos em amostras de pontos de atendimento. Esses ensaios (possivelmente um único LFA) deve ser suave o suficiente para funcionar sem o apoio e a assistência de um laboratório ou grupos de analistas químicos. Os LFAs são um procedimento preferido porque são baratos de fabricar, simples de usar e, o mais importante, amplamente reconhecidos por usuários finais e autoridades regulatórias.
Para mencionar os tipos de ensaio de fluxo lateral, existem dois tipos de testes de ensaio de fluxo lateral. Os tipos de teste de ensaio de fluxo lateral são baseados na amostra a ser testada. Os dois tipos principais têm outras subcategorias. No entanto, o primeiro tipo de ensaio de fluxo lateral é denominado Imunoensaio de Fluxo Lateral e o segundo tipo de LFA é denominado Fluxo Lateral de Ácido Nucleico. O imunoensaio de fluxo lateral é classificado em duas partes. Um funciona com base em anticorpos que atuam como a maior parte da amostra para fins de reconhecimento. Considerando que o segundo tem vários agentes de reconhecimento ou ingredientes, como proteínas, hormônios, etc. O segundo tipo de ensaio de fluxo lateral é chamado de ensaio de fluxo lateral de ácido nucléico que ajuda na detecção de amplicons que podem ter sido criados durante reação em cadeia da polimerase (PCR).
Para desenvolver os testes de Ensaio de Fluxo Lateral, existem dois métodos que podem ser usados. O primeiro método é chamado de formato de vareta, enquanto o segundo formato é chamado de cassete armazenada. Seu funcionamento é o mesmo, porém dependem do formato, exigência do mercado, matriz e indústria. No teste de ensaio de fluxo lateral, existem dois formatos que funcionam. Um é conhecido como sanduíche e o segundo com o nome de formato competitivo. O formato de sanduíche é usado para a detecção de analitos grandes que teriam dois sítios de ligação ou epítopos. O resultado do formato sanduíche está em intensidade de sinal no ponto da linha de teste que direciona proporcionalmente à quantidade de analito presente na amostra. Eliminando o fator da quantidade de analito, se a linha controle possuir uma espécie de anticorpo ela terá o poder de ligar as nanopartículas que irão ainda levar a produzir o sinal da linha controle para mostrar o bom funcionamento do ensaio de fluxo lateral.
Nos testes de ensaio de fluxo lateral, as nanopartículas atuam como repórteres no resultado de um determinado teste. O resultado do teste pode ser lido e analisado por olhos também denominados qualitativos ou semiquantitativos ou simplesmente com o auxílio de um instrumento denominado leitura quantitativa. O teste de ensaio de fluxo lateral é mais viável e pode produzir resultados verdadeiros e desejáveis quando o tamanho das partículas está entre 20 nm a 50 nm. Para que o sinal resultante seja mais forte, existem partículas fluorescentes que podem ser usadas para um sinal ainda mais forte na produção ou resultados da amostra como resultado. Passando para o formato competitivo do teste de ensaio de fluxo lateral, eles são usados para a detecção dos analitos, especialmente no caso em que os pares de anticorpos não estão disponíveis ou o analito não é grande, mas pequeno para uma infinidade de eventos de ligação de anticorpos. A linha de teste geralmente contém a molécula de analito, que normalmente é um complexo de proteína-analito, e a almofada de conjugado compreende o conjugado de detecção de anticorpo-nanopartícula no formato competitivo do Teste de Ensaio de Fluxo Lateral. Se o analito alvo for evidente, o conjugado se ligará a ele, evitando que se ligue ao analito na linha de teste.
A análise dos testes de ensaio de fluxo lateral é baseada em três tipos diferentes de resultados que podem ser confusos. No entanto, os três tipos principais de resultados são qualitativos, semiquantitativos ou quantitativos. Para a análise quantitativa dos testes de ensaio de fluxo lateral, a linha de teste é comparada ao padrão conhecido como padrão de calibração e, em seguida, é convertida no valor de concentração de um analito. No entanto, para obter resultados mais precisos e diretos, o leitor de tira é recomendado para ser usado para analisar e ler o teste.
Conclusão
Os testes de ensaio de fluxo lateral são um dos procedimentos mais amplamente usados e mundialmente conhecidos que têm propriedades exclusivas. Além disso, os testes de fluxo lateral têm sido uma parte da grande contribuição para o setor de saúde e também nos países em desenvolvimento para os quais seu papel é imenso. Seu uso e vantagens não se limitam apenas aos laboratórios; em vez disso, estão sendo usados para testes caseiros e provaram ser eficazes, fáceis de usar e com boa relação custo-benefício. Portanto, os testes de ensaio de fluxo lateral e seus diferentes tipos são úteis em diferentes propósitos diagnósticos e eles continuarão a crescer com outros dispositivos se forem combinados para trazer mais avanço e crescimento para este setor.
Referências
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4986465/
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics#target
https://www.clinisciences.com/en/read/serological-tests-in-mycology-1190/lateral-flow-assay-lfa-2095.html