Predtým, ako sa dostanete k práci a pracovným zásadám Bočný prietok test je dôležité poskytnúť stručný úvod o Test laterálneho toku. Laterálny prietokový test alebo nazývaný aj iným názvom, tj. Imunochromatografia, sa používa na detekciu prítomnosti alebo neprítomnosti analytov na dosiahnutie požadovaných výsledkov. Hlavnými aktérmi tejto skupiny sú antigén, druhy protilátok a vzorka alebo matrica. Tiež, Testy laterálneho toku sa používajú na množstvo detekčných alebo diagnostických účelov, ako sa používajú na detekciu rakoviny markerom rakoviny, tehotenstvom, zisťovaním zneužívania drog alebo predávkovania, patogénov, infekčných chorôb a tiež na srdcové markery.
Funkcia Lateral Flow Assay je založená na 4 fazetách. V prvom rade je to zariadenie, ktoré má vzorkovaciu podložku, konjugovanú podložku, testovaciu čiaru a kontrolnú čiaru (pásik nitrocelulózy). Každá časť tohto vynálezu je oddelená malou vzdialenosťou, ktorá umožňuje plynulý tok vzorky. Prvým krokom k použitiu tohto zariadenia je, že vzorka sa nanesie na zariadenie, ktoré sa úplne zavedie do zariadenia s bočným prietokom. Hneď ako preteká, dochádza k filtračnému procesu, kde sú nežiaduce alebo nežiaduce častice neutralizované alebo filtrované. V rámci daného trvania testu bočného prietokového testu sa celý proces odohrá, a preto je možné vidieť výsledky. Akonáhle sa vzorka dostane do konjugovaného vankúšika zariadenia, sušené častice na podložke sa zmiešajú s časticami vzorky.
Ďalším krokom, ktorý sa stane, je tok nanočastíc viazaných na analyty a získanie prístupu k riadiacim líniám, ktoré ďalej vedú k výsledkom. Vzorka potom môže začať prúdiť do podložky konjugátu, ktorá obsahuje vysoko sfarbené alebo fluorescenčné nanočastice s protilátkou na vrchnej vrstve. K dispozícii je tiež absorpčný vankúš, ktorý úplne absorbuje vzorku alebo roztok vzorky, aby sa zabezpečilo, že v okolí testovacích a kontrolných čiar nezostane žiadna kvapalina. Kontrolná čiara v zariadení s bočným prietokom, ktorá je označená ako C, sa skladá z afinitných žliaz, ktoré ďalej pomáhajú viazať konjugát nanočastíc s prítomnosťou analytu alebo bez neho v roztoku, aby sa zabezpečilo, že test funguje správne, a nie inak. . Metóda testovania pomocou tohto zariadenia je v zásade založená na aspektoch reakcie antigén-protilátka. Ako je uvedené vyššie, testy bočného prietokového testu môžu poskytnúť údaje v dvoch formách buď kvalitatívnej alebo semikvantitatívnej analýzy.
Vedúc ich ďalej k podrobnému vysvetleniu, prvá etapa je vzorkovacia podložka, na ktorú vzorka prúdi a potom je absorbovaná. Existuje šanca, že filter môže byť na podložke vzorky, aby pretekal presným a potrebným množstvom vzorky. Druhá fáza je na konjugovanej podložke. Konjugátový vankúšik začne fungovať potom, čo je vzorka absorbovaná a má konjugované značky a protilátky, ktoré vypočítajú, či sú analyty vo vzorke prítomné alebo nie, pre väzbové udalosti. Po týchto dvoch fázach začne fungovať nitrocelulózová membrána. Na nitrocelulózovej membráne sa analyty alebo protilátky prítomné vo vzorke a konjugovanej podložke naviažu spolu s nitrocelulózovou vložkou. Potom prejde na absorpčnú podložku, ktorá pomôže absorbovať ďalšie množstvo vzorky a priniesť výsledky.
Na ukážku fungovania Test bočného prietokumôže byť uvedený príklad súpravy na rýchly test protilátok pre Covid-19. Keď sa vzorka alebo vzorka pridá do vzorkovacej podložky zariadenia na testovanie bočného prietoku, ďalej prechádza filmom prítomným na zariadení, ktorý sa nazýva filtračný film. Len čo prejde, bude sa testovať prítomnosť alebo neprítomnosť cieľového analytu a ak vzorka bude mať požadované analyty, zlúči sa s antigénom, ktorý sa nazýva antigén označujúci koloidné zlato, ktorý bude mať farebný pás. Ak existuje farebný pás, znamená to prítomnosť cieľových analytov vo vzorke, ktorá bola pridaná do testu bočného prietoku na účely testovania a diagnostiky. A ak nie je žiadna farebná čiara, znamená to, že výsledky sú neplatné. V neposlednom rade je tu kontrolná čiara zariadenia na testovanie laterálneho prietoku, ktorá ukazuje, že do zariadenia bolo pridané dostatočné množstvo vzorky.
Aby sme pochopili, ako funguje test laterálneho toku, je tiež dôležité diskutovať o interpretácii výsledkov. V prvom rade je dôležité porozumieť rôznym častiam zariadenia ako napr konjugovaná podložka, podložka na vzorkyatď. Keď sa teda konjugované protilátky zhromaždia v kontrolných líniách, začnú sa objavovať čiary, ktoré ukazujú výsledky. Viditeľné čiary na zlatých nanosférických štítkoch, ktoré sú najčastejšie používanými štítkami, majú červenú farbu a nevyžadujú žiadny vývoj. Rozmery nanočastice zlata určujú rôzne odtiene červenej a pevnosť je demonštrovaná prahom konjugovaných protilátok obmedzených na imobilizovaných líniách. Ak sa na testovacej čiare objaví červená čiara, znamená to, že výsledok je pozitívny. Keď hovoríme o intenzite, závisí to od množstva analytu prítomného v matrici vzorky. Vzhľad kontrolnej čiary na zariadení na testovanie bočného prietoku je tiež nutnosťou, aby sa zabezpečilo, že bolo podané dostatočné množstvo vzorky a množstvo nie je menšie na testovanie a poskytnutie presných výsledkov.
Fungovanie Test laterálneho toku je relatívne jednoduchšie a zrozumiteľnejšie. Pretože nie sú obmedzené na laboratóriá, skôr pracujú na mimolaboratórne účely, je tiež možné ich ľahko použiť a porozumieť rôznym častiam. Pozoruhodné vlastnosti zariadenia na testovanie bočného prietoku a nanočastice zlata, urobili testovanie jednoduchším a tiež prístupným procesom. Majú obrovskú úlohu v klinických a diagnostických účeloch.
Referencie
https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/lateral-flow-test
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics#target
