Како функционише испитивање бочног протока?
Пре него што се упустимо у рад и принципе рада теста латералног протока , важно је дати кратак увод о тесту латералног протока . Тест латералног протока, или како се може назвати другим именом, тј. имунохроматографија, користи се за откривање присуства или одсуства аналита како би се добили жељени резултати. Главни актери укључени у ову групу су антиген, врсте антитела и узорак или матрица. Такође, тестови латералног протока се користе за бројне сврхе откривања или дијагностике, као што је откривање рака помоћу маркера рака, трудноће, откривање злоупотребе или предозирања дрогама, патогена, заразних болести, а такође и за срчане маркере.
Рад теста латералног протока заснива се на 4 аспекта. Пре свега, то је уређај који има подлогу за узорак, подлогу за коњугацију, тест линију и контролну линију ( нитроцелулозну траку ). Сваки део овог уређаја је одвојен малим растојањем које омогућава несметан проток узорка. Први корак у коришћењу овог уређаја је да се узорак стави на уређај који се у потпуности усмерава до уређаја за латерални проток. Када потече, одвија се процес филтрације где се нежељене или непожељне честице неутралишу или филтрирају. У року од датог времена завршетка теста латералног протока, цео процес се одвија и стога се могу видети резултати. Када узорак стигне до подлоге за коњугацију уређаја, осушене честице на подлози се мешају са честицама узорка.
Следећи корак који се дешава је ток наночестица везаних за аналит и приступ контролним линијама што даље доводи до резултата. Узорак тада може почети да тече до коњугованог јастучића, који садржи високо обојене или флуоресцентне наночестице са антителом на горњем слоју. Ту је и јастучић за упијање који потпуно упија узорак или течност узорка како би се осигурало да не остане течност иза тестних и контролних линија. Контролна линија у уређају за бочни ток означена као Ц састоји се од афинитетних жлезда које додатно помажу у везивању коњугата наночестица са или без присуства аналита у раствору како би били сигурни да тест ради исправно, а не другачије . У основи, метода испитивања помоћу овог уређаја заснива се на аспектима реакције антиген-антитело. Као што је горе поменуто, тестови испитивања латералног тока могу дати очитавање у два облика, било квалитативну или полуквантитативну анализу.
Водећи их даље до детаљног објашњења, прва фаза је јастучић за узорак на који се узорак тече, а затим апсорбује. Постоји шанса да филтер може бити на јастучићу за узорак како би текао тачна и потребна количина узорка. Друга фаза је на коњугованом јастучићу. Коњугирани јастучић почиње да ради након што се узорак апсорбује и има коњуговане ознаке и антитела која ће израчунати да ли су аналити присутни у узорку или не за догађаје везивања. Након ове две фазе, рад нитроцелулозне мембране почиње да ради. На нитроцелулозној мембрани, аналити или антитела присутна у узорку и коњугованој подлози ће се везати заједно са онима из нитроцелулозне подлоге. Након тога, он ће прећи на упијајућу подлогу која ће помоћи у упијању додатне количине узорка и постизању резултата.
Да би се илустровао рад теста латералног протока , може се узети пример брзог теста за антитела на Ковид-19. Када се узорак или примерак дода на подлогу за узорке уређаја за латерални проток, он даље пролази кроз филм који се налази на уређају, а то је филтер филм. Након што прође, тестираће се присуство или одсуство циљаног аналита и, ако узорак садржи жељене аналите, он ће се спојити са антигеном који се назива колоидно-златни антиген, који ће имати обојену траку. Ако постоји обојена трака, то означава присуство циљаних аналита у узорку који је додат у тест латералног протока у сврху тестирања и дијагностике. А ако нема обојене линије, то значи да су резултати неважећи. На крају, али не и најмање важно, постоји контролна линија уређаја за латерални проток која показује да је довољна количина узорка додата у уређај.
Да би се разумело како функционише тест латералног протока, важно је размотрити и тумачење резултата. Пре свега, важно је разумети различите делове уређаја, као што су подлога за коњуговане , подлога за узорке итд. Дакле, када се коњугована антитела окупе на контролним линијама, линије почињу да се појављују и приказују резултате. Видљиве линије на етикетама златних наносфера, које су најчешће коришћене етикете, црвене су боје и не захтевају никакво развијање. Димензије златних наночестица одређују различите нијансе црвене, а јачина се показује прагом коњугованих антитела ограничених на имобилизованим линијама. Ако се црвена линија појави на тест линији, то указује да је резултат позитиван. Што се тиче интензитета, он зависи од количине аналита присутног у матрици узорка. Такође, појава контролне линије на уређају за тест латералног протока је неопходна како би се осигурало да је дата довољна количина узорка и да количина није мања за тестирање и давање тачних резултата.
Закључак
Рад теста латералног протока је релативно лакши и разумљивији. Пошто нису ограничени на лабораторије, већ раде и ван лабораторијски, лако се могу користити и разумети различити делови. Изузетна својства уређаја за тест латералног протока и златних наночестица учинила су тестирање лакшим и приступачнијим процесом. Они имају огромну улогу у клиничким и дијагностичким сврхама.
Референце
https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/lateral-flow-test
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics#target