Анализе бочног тока: принципи, дизајн и ознаке
Тестови латералног протока су уређаји који се користе за спровођење различитих врста тестирања и тестирања на месту неге, а познати су и као реалистично тестирање. Тестови латералног протока су мали и минимални уређаји који се користе у скоро свакој области медицине где је присутна детекција аналита. Гледајући тренутну ситуацију на глобалном нивоу, они се такође користе за тестирање на коронавирус. Пошто су поуздани, исплативи и доступни свима, користе се за тестове трудноће , бактеријске инфекције, вирусне инфекције и паразитске инфекције. Тестови латералног протока не захтевају никакво обучено или специјализовано особље. Техника латералног протока ради на биохемијском спајању антитела и антигена или хибридизацији ДНК циља и ДНК.
Принципи
Принципи на којима функционише тест латералног протока су прилично основни. У тесту латералног протока, течни узорак или матрица тече уз помоћ вечних сила, тј. капиларног дејства. Матрица садржи циљни аналит који је неопходан за детекцију и добијање резултата. Течност тече кроз различите полимерне траке где се аналити и молекули могу комбиновати. Читав принцип функционише на различитим деловима теста латералног протока, јер постоје различити јастучићи кроз које течност мора да тече да би се добили резултати. Први корак у коришћењу овог уређаја је да се узорак стави на уређај који се у потпуности усмерава до уређаја за латерални проток. Када почне да тече, одвија се процес филтрације где се нежељене или непожељне честице неутралишу или филтрирају. У року од датог трајања завршетка теста латералног протока, одвија се цео процес и тако се могу видети резултати. Када узорак стигне до коњугованог јастучића уређаја, осушене честице на јастучићу се мешају са честицама узорка. Следећи корак који се дешава је проток наночестица везаних за аналит и добијање приступа контролним линијама што даље доводи до резултата. Узорак затим може почети да тече до конјугатне подлоге, која садржи јако обојене или флуоресцентне наночестице са антителом на свом горњем слоју. Постоји и подлога за упијање која потпуно апсорбује узорак или течност узорка како би се осигурало да не остане течности око тест и контролних линија. Након што се процес заврши, пратећи његов принцип рада, постижу се резултати.
дизајна
Дизајни латералног протока се састоје од хроматографског система. У хроматографском систему, компоненте се раздвајају на основу њиховог кретања кроз реакциону мембрану, као и имунолошке реакције као што је реакција антигена и антитела или хибридизација ДНК, и циљног аналита нуклеинске киселине. Штавише, латерални проток је дизајниран са подлогом за узорак, подлогом за коњугате, нитроцелулозном мембраном, ознакама, наночестицама, подлогом за упијајући адсорбент и пуфером причвршћеним за њу само код неких уређаја. Дизајни латералних протока зависе од употребе, стабилности, перформанси и безбедности. Постоје модули који се морају поштовати за формирање латералних протока и уређаја за тестирање. Код дизајна латералних протока, физички захтеви су веома важни. Ови физички захтеви ЛФА су димензије кертриџа, карактеристике кертриџа, тј. подлога за коњугате и подлога за узорке, спецификације читача итд. Дизајн ЛФА такође зависи од функционалности и карактеристика одређеног дизајна. На пример, функционалност и карактеристике повезане са њим ће укључивати метод анализе, формат за циљни аналит за тестирање, клиничке перформансе, границу осетљивости и специфичности и тако даље. Два друга важна фактора у дизајну теста бочног тока су захтеви за руковање и саднице. Захтеви за руковање код дизајна ЛФА су релевантнији за животну средину и век трајања љуске. Док су захтеви за узорковање код дизајна теста бочног тока врсте узорка, температура на којој се узорак може чувати, температура потребна за складиштење и третман узорка.
Lejblovi
У тесту бочног протока користе се различити материјали којима се даје назив етикета. Неке од ознака које се користе у ЛФА су златне наночестице, квантне тачке, обојене перлице од латекса, наночестице сребра, наночестице селена, ензими, липосоми и многе друге. Ево неколико ознака у ЛФА о којима ће бити речи. Свака ознака која се користи у тесту латералног тока мора се открити при врло ниској концентрацији, а својства ознака треба задржати до коњугације са молекулима биопрепознавања. Прво, наночестице колоидног злата једна су од најчешћих ознака. Честице колоидног злата су имобилизиране и имају савршен облик сфере. Штавише, колоидне наночестице злата имају релативно висок афинитет према биомолекулима што њихову функционалност чини једноставном. Њихова величина и облик варирају. Неке од најистакнутијих карактеристика златних наночестица су њихов састав који не штети животној средини, њихов велики афинитет према молекулима и протеинима, добра оптичка сигнализација и њихова стабилност. Друга ознака која се користи у ЛФА су магнетне честице и агрегати који се користе за сигнализацију у уређајима. Магнетно обојене честице у ЛФА се користе или производе обојене линије које чита инструмент или читач трака. Постоји и читач магнетних тестова који се користи за читање сигнала који долазе од њих. Ензими се такође користе у ЛФА и повећавају један корак у целом процесу. Додаје корак додавања одговарајућег супстрата након завршетка теста. Колоидни угљеник се такође користи у ЛФА и црној боји. Због своје боје лако се детектују са високом осетљивошћу.
Закључак
Тестови латералног протока су једни од најчешће коришћених уређаја. Принципи, дизајн и ознаке теста латералног протока могу се разликовати код неких уређаја за латерални проток, што такође модификује рад тог одређеног уређаја за латерални проток. Сви принципи, дизајн и ознаке су важни делови ЛФА.
Референце
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4986465/
https://nanocomposix.com/pages/lateral-flow-assay-design
https://www.nature.com/articles/s41598-018-35694-9
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S131961031400129X