
什么是侧流免疫层析分析?

侧向流动免疫层析法(LFIA)是一种用于检测给定样品中分析物的装置。免疫层析法是色谱法和免疫分析法的结合。LFIA 是最经济、应用最广泛的检测装置之一。侧向流动免疫层析法由多个部件组成,例如样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜和吸附垫。此外,侧向流动免疫层析法也有不同的类型,例如由单片纤维素膜制成,并通过激光切割工艺进一步加工而成。与其他免疫分析方法(例如酶联免疫吸附试验 (ELISA) 或蛋白质印迹法)相比,LFIA 具有更优的性能、更高的可靠性和更快的速度。不仅如此,它们还具有成本效益高、材料用量少的优点。更重要的是,它们节省时间,可在约 20 分钟内得出结果。侧向流动免疫层析法适用于多种样本基质,例如血清、尿液、精液、血液和唾液。目前,该方法可用于多种检测用途,例如妊娠检测、快速诊断检测、流感、结核病和疟疾检测。此外,它还可用于家庭自测、食品安全检测、生物制剂检测和兽医学领域。
如上所述,侧向流动免疫层析法(LFIA)也采用单张硝酸纤维素膜进行检测,从而获得更快更准确的结果。因此,我们测试了该方法对恶性疟原虫组氨酸富集蛋白2(PfHRP2)的检测能力。PfHRP2是疟疾感染的生物标志物,其检测浓度低至4 ng mL⁻¹,肉眼可见。此外,该方法与其他几种疟原虫蛋白生物标志物不存在交叉反应。现在,我们开发了一种使用单张硝酸纤维素膜进行检测的侧向流动免疫层析法,与现有的用于检测PfHRP1的LFIA相比,该方法获得了可靠且准确的结果。此外,该方法不仅可以用于疟疾检测,还可以检测其他蛋白生物标志物。

侧向流动免疫层析法(LFIA)的工作原理基于以下几个基本原理。首先,其工作原理与酶联免疫吸附试验(ELISA)的夹心法类似,区别在于免疫反应的毛细作用是通过层析纸进行的。其次,当样本基质滴加到LFIA装置的样品垫上时,样品垫上的抗原与抗体结合形成一种称为免疫复合物(抗体-抗原复合物)的物质。该免疫复合物随后会进一步向LFIA装置的其他部分移动,并与固定在装置硝酸纤维素膜上的抗体接触。当形成更多复合物时,紫红色条带开始出现,表明结果为阳性,即样本中存在目标抗原。免疫层析装置是通过将样品垫连接到膜的末端而制成的。
在侧向流动免疫分析 (LFIA) 仪上进行免疫层析测试需要四个步骤。第一步是将样品滴加到样品垫上。样品通过样品垫后,分子开始溶解。检测分子的溶解至关重要,因为它们会与样品中的目标分析物结合,从而确保阳性结果的准确性。之后,毛细作用开始发挥作用。毛细作用会将整个液体混合物输送到硝酸纤维素膜上。硝酸纤维素膜上固定有抗原或抗体,它们会进一步与样品中存在的目标分析物结合,从而产生阳性结果。如果结果为阳性,则会出现一条粉红色或紫色的线。末端的吸附垫会吸收任何未被吸收的样品残留物。

侧向流动免疫层析法的优点在于:可靠、快速、准确且易于使用。此外,它经济高效,可用于多种诊断目的。该方法不受气候变化的影响,无需针对不同气候条件进行任何限制。由于只需使用一次,因此检测过程卫生可靠。而且,该试剂盒无需处方即可轻松购买,节省时间。最后,该检测仅需极少量样本。然而,侧向流动免疫层析法也存在一些局限性。首先,它更侧重于质量结果而非定量结果。其次,由于它可以同时检测两种分析物,因此其灵敏度不如其他一些检测设备。
侧向流动免疫层析法(LFIA)应用广泛。它在临床诊断中用于多种用途,例如筛查和检测各种临床标志物。此外,它还可用于居家检测,检测多种疾病,例如性传播疾病、疟疾、结核病、肝病以及男女生殖健康。LFIA 也可用于检测人绒毛膜促性腺激素 (HCG) 或妊娠。LFIA 是检测各种病毒、细菌甚至寄生虫感染(例如登革热、梅毒、丝虫病等)的首选检测方法。它还应用于法医学和癌症生物标志物检测。

结语
侧向层析免疫分析法是目前最受欢迎且最简便的检测方法之一。它技术先进、操作简便、可靠高效。尽管存在一些局限性,但与侧向层析免疫分析法的优势相比,这些局限性微不足道。该方法被认为是现代且常用的检测手段,其广泛的应用证明了其有效性和可靠性。因此,侧向层析免疫分析法可用于各种医学检测。
案例
https://www.onlinebiologynotes.com/immunochromatography-assay-ica-principle-components-steps-merits-limitations-and-applications/
https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2021/an/d0an02073g#!divAbstract
https://www.sciencedirect.com/topics/chemistry/immunochromatography
