Come funziona un dosaggio a flusso laterale?

Prima di addentrarci nei principi di funzionamento e di funzionamento del Flusso laterale saggio è importante fare una breve introduzione sul Analisi del flusso laterale. Lateral Flow Assay o per essere chiamato con un altro nome, ad esempio l'immunocromatografia viene utilizzata per rilevare la presenza o l'assenza degli analiti per ottenere i risultati desiderati. I principali attori coinvolti in questo gruppo sono l'antigene, la specie anticorpale e il campione o la matrice. Anche, Saggi a flusso laterale sono utilizzati per una serie di scopi di rilevamento o diagnostici come sono utilizzati per l'individuazione del cancro mediante marker del cancro, gravidanza, rilevamento di abuso di droghe o overdose, agenti patogeni, malattie infettive e anche per marker cardiaci.

Il funzionamento del Lateral Flow Assay si basa su 4 aspetti. Innanzitutto, è un dispositivo dotato di un tampone per il campione, un tampone per il coniugato, una linea di test e una linea di controllo (striscia di nitrocellulosa). Ogni parte di questo escogitato è separata da una piccola distanza che consente il flusso regolare del campione. Il primo passo per utilizzare questo dispositivo è che il campione viene messo sul dispositivo che viene fatto fluire completamente al dispositivo di flusso laterale. Una volta che scorre, si verifica il processo di filtrazione in cui le particelle indesiderate o indesiderabili vengono neutralizzate o filtrate. Entro la data durata del completamento del test del dosaggio del flusso laterale, si verifica l'intero processo e quindi i risultati possono essere visti. Quando il campione raggiunge il tampone coniugato del dispositivo, le particelle essiccate sul tampone vengono mescolate con le particelle del campione.

Il passo successivo che avviene è il flusso di nanoparticelle legate all'analita e l'accesso alle linee di controllo che portano ulteriormente ai risultati. Il campione può quindi iniziare a fluire verso il tampone coniugato, che contiene nanoparticelle altamente colorate o fluorescenti con un anticorpo sul loro strato superiore. C'è anche un tampone assorbente che assorbe completamente il campione o il liquido campione per garantire che non rimanga liquido intorno alle linee di test e di controllo. La linea di controllo nel dispositivo a flusso laterale etichettato come C è composta da ghiandole di affinità che aiutano ulteriormente a legare il coniugato di nanoparticelle con o senza la presenza di un analita nella soluzione per assicurarsi che il test funzioni correttamente piuttosto che il contrario . Fondamentalmente, il metodo di test utilizzando questo dispositivo si basa sugli aspetti della reazione antigene-anticorpo. Come sopra menzionato, i test di analisi del flusso laterale possono fornire la lettura in due forme di analisi qualitativa o semiquantitativa.

Guidandoli ulteriormente alla spiegazione elaborata, il primo stadio è del tampone del campione su cui il campione viene fatto scorrere e quindi assorbito. È possibile che il filtro si trovi sul pad del campione per far fluire la quantità accurata e necessaria del campione. Il secondo stadio è sul pad coniugato. Il tampone del coniugato inizia a funzionare dopo che il campione è stato assorbito e dispone di etichette coniugate e anticorpi che calcoleranno se gli analiti sono presenti nel campione o meno per gli eventi di legame. Dopo queste due fasi inizia il funzionamento della membrana di nitrocellulosa. Sulla membrana di nitrocellulosa, gli analiti o gli anticorpi presenti nel campione e nel tampone coniugato si legheranno insieme a quelli del tampone di nitrocellulosa. Successivamente, passerà al tampone assorbente che aiuterà ad assorbire una quantità extra di campione e a produrre i risultati.

Per esemplificare il funzionamento del Test di analisi del flusso laterale, si può prendere l'esempio del kit per il test rapido degli anticorpi del Covid-19. Quando il campione o il campione viene aggiunto al tampone del campione del dispositivo di analisi a flusso laterale, passa ulteriormente attraverso un film presente sul dispositivo chiamato film filtrante. Una volta superato, verrà testata la presenza o l'assenza dell'analita target e se il campione avrà gli analiti desiderati si amalgamerà con un antigene chiamato antigene colloidale-etichetta oro che avrà una banda colorata. Se è presente una banda colorata, indica la presenza di analiti target nel campione che è stato aggiunto al test del saggio a flusso laterale per test e scopi diagnostici. E se non c'è una linea colorata significa che i risultati non sono validi. Ultimo ma non meno importante, c'è una linea di controllo del dispositivo di analisi a flusso laterale che mostra che una quantità sufficiente di campione è stata aggiunta al dispositivo.

Per capire come funziona un saggio di flusso laterale è anche pertinente discutere l'interpretazione dei risultati. Prima di tutto, è importante capire le diverse parti del dispositivo come pad coniugato, tampone di campionamento, ecc. Quindi, quando gli anticorpi coniugati si raccolgono sulle linee di controllo, le linee iniziano ad apparire per mostrare i risultati. Le linee visibili sulle etichette delle nanosfere d'oro che sono le etichette più utilizzate, sono di colore rosso e non richiedono alcuno sviluppo. Le dimensioni del nanoparticelle d'oro determinano le diverse sfumature di rosso, e la forza è dimostrata dalla soglia degli anticorpi coniugati confinati alle linee immobilizzate. Se appare una linea rossa sulla linea del test, significa che il risultato è positivo. Per quanto riguarda l'intensità, essa dipende dalla quantità di analita presente nella matrice del campione. Inoltre, l'aspetto della linea di controllo sul dispositivo di analisi del flusso laterale è un must per garantire che sia stata somministrata una quantità sufficiente di campione e che la quantità non sia inferiore per il test e per ottenere risultati accurati.

Conclusione

Il funzionamento del Analisi del flusso laterale è relativamente più facile e comprensibile. Dal momento che non sono limitati ai laboratori, piuttosto funzionano anche per scopi fuori laboratorio, è possibile utilizzarli facilmente e comprendere parti diverse. Le notevoli proprietà del dispositivo di analisi del flusso laterale e il nanoparticelle d'oro, hanno reso il test un processo più semplice e anche accessibile. Hanno un ruolo immenso negli scopi clinici e diagnostici.

Referenze
https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/lateral-flow-test
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics#target