Alvorens in te gaan op de werking en werkingsprincipes van de Laterale stroom analyse het is belangrijk om een korte introductie te geven over de Laterale stroomtest As. Lateral Flow Assay of met een andere naam te noemen, dwz immunochromatografie wordt gebruikt om de aan- of afwezigheid van de analyten te detecteren om de gewenste resultaten te krijgen. De belangrijkste actoren die bij deze groep betrokken zijn, zijn antigeen, antilichaamsoorten en het monster of de matrix. Ook, Laterale-flow-assays worden gebruikt voor een aantal detectie- of diagnostische doeleinden, zoals ze worden gebruikt voor de detectie van kanker door kankermarkers, zwangerschap, detectie van drugsmisbruik of overdosis, pathogenen, infectieziekten en ook voor hartmarkers.
De werking van de Lateral Flow Assay is gebaseerd op 4 facetten. Allereerst is het een apparaat met een monsterkussen, een geconjugeerd kussentje, een testlijn en een controlelijn (nitrocellulosestrip). Elk onderdeel hiervan is gescheiden door een kleine afstand die een soepele stroom van het monster mogelijk maakt. De eerste stap om dit apparaat te gebruiken, is dat het monster volledig op het apparaat wordt geplaatst dat naar het laterale stroomapparaat wordt gestroomd. Zodra het stroomt, vindt het filtratieproces plaats waar de ongewenste of ongewenste deeltjes worden geneutraliseerd of gefilterd. Binnen de gegeven duur van de voltooiing van de laterale-flow-testtest, vindt het hele proces plaats en kunnen de resultaten worden gezien. Wanneer het monster het geconjugeerde kussen van het apparaat bereikt, worden de gedroogde deeltjes op het kussen vermengd met de deeltjes van het monster.
De volgende stap die plaatsvindt, is de stroom van analytgebonden nanodeeltjes en toegang krijgen tot de controlelijnen die verder naar de resultaten leiden. Het monster kan dan naar het geconjugeerde kussen gaan, dat sterk gekleurde of fluorescerende nanodeeltjes bevat met een antilichaam op hun bovenste laag. Er is ook een wicking pad dat het monster of de monstervloeistof volledig absorbeert om ervoor te zorgen dat er geen vloeistof achterblijft rond de test- en controlelijnen. De controlelijn in het laterale stroomapparaat dat is gelabeld als C, bestaat uit affiniteitsklieren die verder helpen om het nanodeeltjesconjugaat te binden met of zonder de aanwezigheid van een analyt in de oplossing om ervoor te zorgen dat de test goed werkt in plaats van de andere . Kortom, de testmethode met dit apparaat is gebaseerd op de aspecten van antigeen-antilichaamreactie. Zoals hierboven vermeld, kunnen de laterale-flow-assaytests de aflezing in twee vormen geven, hetzij kwalitatieve of semi-kwantitatieve analyse.
Wat hen verder leidt naar de uitgebreide uitleg, is de eerste fase van het monsterkussen waarop het monster wordt gestroomd en vervolgens wordt geabsorbeerd. Er is een kans dat het filter zich op het monsterkussen bevindt om de juiste en benodigde hoeveelheid monster te laten stromen. De tweede fase bevindt zich op de geconjugeerde pad. De geconjugeerde pad begint te werken nadat het monster is geabsorbeerd en het heeft geconjugeerde labels en antilichamen die zullen berekenen of de analyten in het monster aanwezig zijn of niet voor de bindingsgebeurtenissen. Na deze twee fasen begint de werking van het nitrocellulosemembraan te werken. Op het nitrocellulosemembraan zullen de analyten of de antilichamen die aanwezig zijn in het monster en het geconjugeerde kussentje samen binden met die van het nitrocellulosekussentje. Hierna gaat het over op het absorberende kussentje dat zal helpen bij het absorberen van een extra hoeveelheid monster en het produceren van de resultaten.
Om de werking van de te illustreren Laterale Flow Assay-test, kan het voorbeeld van de antilichaam-sneltestkit van Covid-19 worden genomen. Wanneer het monster of het monster wordt toegevoegd aan het monsterkussen van het laterale-stroomtestapparaat, gaat het verder door een film die op het apparaat aanwezig is en die filterfilm wordt genoemd. Als het eenmaal is gepasseerd, wordt de aan- of afwezigheid van de doelanalyt getest en als het monster de gewenste analyten zal hebben, zal het samensmelten met een antigeen dat colloïdaal-goudlabelantigeen wordt genoemd en dat een gekleurde band zal hebben. Als er een gekleurde band is, duidt dit op de aanwezigheid van doelanalyten in het monster dat voor test- en diagnostische doeleinden aan de laterale-flowtest is toegevoegd. En als er geen gekleurde lijn is, betekent dit dat de resultaten ongeldig zijn. Last but not least is er een controlelijn van het Lateral Flow Assay-apparaat die aangeeft dat er voldoende van het monster aan het apparaat is toegevoegd.
Om te begrijpen hoe een laterale flow-assay werkt, is het ook relevant om de interpretatie van de resultaten te bespreken. Allereerst is het belangrijk om de verschillende onderdelen van het apparaat te begrijpen, zoals: geconjugeerde pad, voorbeeldblok, enz. Dus wanneer de geconjugeerde antilichamen zich verzamelen bij de controlelijnen, beginnen de lijnen te verschijnen om de resultaten te tonen. De zichtbare lijnen op gouden nanosfeerlabels, de meest gebruikte labels, zijn rood van kleur en behoeven geen ontwikkeling. De afmetingen van de gouden nanodeeltjes bepaal de verschillende tinten rood, en de sterkte wordt aangetoond door de drempel van geconjugeerde antilichamen die op de geïmmobiliseerde lijnen zijn opgesloten. Als er een rode lijn op de testlijn verschijnt, geeft dit aan dat het resultaat positief is. Over de intensiteit gesproken, deze hangt af van de hoeveelheid analyt die in de matrix van het monster aanwezig is. Ook is het uiterlijk van de controlelijn op het laterale-flow-assay-apparaat een must om ervoor te zorgen dat er voldoende monster is toegediend en de hoeveelheid is niet minder voor het testen en het geven van nauwkeurige resultaten.
De werking van de Laterale stroomtest As is relatief eenvoudiger en begrijpelijker. Omdat ze niet beperkt zijn tot de laboratoria, maar dat ze ook buiten het laboratorium werken, kan men ze gemakkelijk gebruiken en verschillende onderdelen begrijpen. De opmerkelijke eigenschappen van het laterale flow-assay-apparaat, en de gouden nanodeeltjes, hebben het testen een eenvoudiger en ook toegankelijker proces gemaakt. Ze spelen een enorme rol in klinische en diagnostische doeleinden.
Referenties
https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/lateral-flow-test
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://www.abingdonhealth.com/services/what-is-lateral-flow-immunoassay/
https://nanocomposix.com/pages/introduction-to-lateral-flow-rapid-test-diagnostics#target
