Hvad er immunokromatografisk assay til lateralt flow?
Lateral flow immunokromatografiske assays er de apparater, der bruges til at detektere analytter i en given prøve. Immunokromatografi er en kombination af kromatografi og immunoanalyser. LFIA'er er de billigste og mest anvendte apparater til at udføre forskellige typer tests. Der er forskellige dele af Lateral Flow immunokromatografiske assays, såsom prøvepude, konjugatpar, nitrocellulosemembran og adsorbentpude. Der findes dog forskellige typer Lateral Flow immunokromatografiske assays, såsom dem, der er lavet af et enkelt stykke eller ark cellulosemembran, som derefter fremstilles yderligere ved laserskæring. Sammenlignet med andre former for immunoanalyser, såsom enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) eller western blot, er LFIA'erne bedre, pålidelige og hurtige. Ikke nok med det, men de giver også fordelene ved omkostningseffektivitet og materialebesparelse. Desuden sparer de tid og producerer resultater inden for et kort tidsrum, der er cirka inden for 20 minutter eller omkring 20 minutter. Lateral flow immunokromatografiske assays er kompatible med en bred vifte af matricer såsom serum, urin, sæd, blod og spyt. De moderne assays bruges til forskellige testformål, såsom graviditetstest , hurtige diagnostiske tests, influenza, tuberkulose (TB) og malaria. De bruges også til hjemmetestning, fødevaresikkerhedstest, detektion af biologiske agenser og veterinærmedicin.
Som nævnt ovenfor fremstilles lateral flow-immunokromatografiske assays også med et enkelt stykke nitrocellulosemembran, hvilket giver hurtigere og præcise resultater. Derfor blev de testet for påvisning af Plasmodium falciparum histidin-rich protein 2 (PfHRP2), som er en biomarkør for en malariainfektion, der kan detekteres ved en lav koncentration på op til 4 ng mL⁻¹ og kan ses med det blotte øje. Der var heller ingen elementer af krydsreaktivitet med nogle få af de andre proteinbiomarkører i Plasmodium. Da Lateral Flow Immunokromatografisk Assay nu skabte en med et ark nitrocellulosemembran, der blev brugt til testning, gav det pålidelige og præcise resultater sammenlignet med de eksisterende LFIA'er til PfHRP2-detektion. Derudover kan den udføre malariadetektionstest, og andre proteinbiomarkører kan også testes.
Der er et par principper, som Lateral Flow Immunochromatografi Assay fungerer efter. For det første er arbejdsteknikkerne de samme som for ELISA-sandwichteknikken, men forskellen ligger i processen, hvor den kapillære virkning af den immunologiske reaktion føres gennem det kromatografiske papir. For det andet, når prøvens matrix droppes på prøvepuden på LFIA-enheden, dannes et kompleks kendt som immunkomplekset (Ab-Ag-komplekset) på grund af antigenerne på prøvepuden med antistoffet. Dette immunkompleks bevæger sig derefter videre mod de andre dele af LFIA-enheden og kommer i kontakt med de antistoffer, der er låst fast på anordningens nitrocellulosemembran. Når der dannes flere komplekser, begynder den lilla-røde linje at vise sig, hvilket angiver det positive resultat, dvs. at det målrettede antigen er til stede i prøven. Den immunokromatografiske enhed oprettes ved at fastgøre prøvepuden til enden af membranen.
Der kræves fire trin for at udføre en immunokromatografisk test på LFIA-enheden. Det første trin er at placere prøven på prøvepuden. Efter at prøven har været igennem prøvepuden, begynder solubiliseringen af molekylerne. Her er solubiliseringen af detektormolekylet vigtig, da det for at beskytte de positive resultater vil binde sig til målanalytten i prøven. Efter disse trin starter kapillærvirkningen. Hele væskeblandingen føres til nitrocellulosemembranen ved hjælp af kapillærvirkning. Nu vil der i nitrocellulosemembranen være det immobiliserede antigen eller antistof, som yderligere vil kombinere med målanalytten og dermed give positive resultater, hvis de er til stede i prøven. Hvis resultatet er positivt, vil enten en lyserød eller lilla linje fremkomme. Den absorberende pude i enden absorberer eventuelle ekstra, uabsorberede dele af prøven.
For at opsummere fordelene ved Lateral Flow Immunochromatographic Assay er det pålideligt, hurtigt, præcist og nemt at bruge. Desuden er det omkostningseffektivt og kan bruges til forskellige diagnostiske formål. Der er ingen begrænsninger og forhindringer i forhold til klimaændringer og forbehold for forskellige klimaer. Det er kun til engangsbrug, hvilket giver hygiejniske og sikre tests. De er også let tilgængelige i håndkøb, og man behøver ikke at få en recept, hvilket sparer tid. Endelig kræver det en meget lille mængde prøvevolumen for at gennemgå testproceduren. Udover fordelene er der også få begrænsninger. For det første har det en tendens til at forbedre kvaliteten af resultaterne snarere end kvantitative resultater. Endelig er det ikke så følsomt som andre enheder, da det kan detektere to analytter samtidigt.
Der er brede anvendelser af Lateral Flow Immunochromatographic Assay. Det bruges til flere formål i den kliniske diagnose til screening og detektion af forskellige kliniske markører. Derudover bruges det også til hjemmebaseret testning og detektering af forskellige typer sygdomme såsom seksuelt overførte sygdomme, malaria, tuberkulose, leversygdomme, og reproduktiv sundhed hos begge køn kan også testes. Humant choriongonadotropin (HCG) eller graviditetstest kan også detekteres ved hjælp af Lateral Flow Immunochromatographic Assay. LFIA er den mest foretrukne testmetode til at detektere enhver form for virus-, bakterie- eller endda parasitinfektioner såsom dengue, syfilis, filariasis osv. Det bruges også i videnskabelig retsmedicin og kræftbiomarkører.
Konklusion
Lateral Flow Immunochromatographic Assay er den mest foretrukne og nemme metode til at udføre enhver form for test. Den er teknologisk udstyret, nem at bruge, pålidelig og en effektiv metode. Der er nogle begrænsninger, der ikke vejer tungt i forhold til fordelene ved Lateral Flow Immunochromatographic Assay. De betragtes som moderne og konventionelle til detektion af tests, og deres brede anvendelse beviser deres autenticitet og troværdighed. Derfor kan Lateral Flow Immunochromatographic Assays bruges til en bred vifte af formål relateret til enhver form for medicinsk testning.
Referencer
https://www.onlinebiologynotes.com/immunochromatography-assay-ica-principle-components-steps-merits-limitations-and-applications/
https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2021/an/d0an02073g#!divAbstract
https://www.sciencedirect.com/topics/chemistry/immunochromatography