Hvad er immunokromatografisk assay til lateralt flow?
Lateral strømning Immunkromatografiske assays er de enheder, der bruges til påvisning af analytter i den givne prøve. Immunkromatografi er kombinationen af kromatografi og immunoanalyser. LFIA'er er de billigste og mest udbredte enheder til at udføre forskellige typer tests. Der er forskellige dele af Lateral Flow -immunkromatografiske assays, såsom prøvepude, konjugeret par, nitrocellulosemembran og adsorberende pude. Der er imidlertid forskellige typer af lateralt flow immunkromatografisk assay, f.eks. Det, der er skabt ud fra det enkelte stykke eller et stykke cellulosemembran, som derefter fremstilles yderligere ved laserskæringsprocessen. At sammenligne det med de andre former for Immuno Assay, såsom enzymbundet immunosorbent assay (ELISA) eller western blot, er LFIA'erne bedre, pålidelige og hurtige. Ikke nok med det, men de giver også fordelene ved omkostningseffektivitet og materiel reduktion. Desuden sparer de tid og producerer resultater inden for et kort tidsinterval, der er cirka inden for 20 minutter eller omkring 20 minutter. Immunokromatografiske analyser til laterale flow er kompatible med en lang række matricer, såsom serum, urin, sæd, blod og spyt. De nutidige assays bruges til forskellige testformål som f.eks graviditetstest, hurtige diagnostiske tests, influenza, tuberkulose (TB) og malaria. De bruges også til hjemmetest, fødevaresikkerhedstest, påvisning af biologisk middel og veterinærmedicin.
Som det er nævnt ovenfor, at immunokromatografiske assays ved lateral strømning er også fremstillet med et enkelt stykke nitrocellulosemembran, hvilket giver hurtigere og præcise resultater. Derfor blev de testet for påvisning af Plasmodium falciparum histidin-rich protein 2 (PfHRP2), som er en biomarkør for en malariainfektion, der kan detekteres ved en lav koncentration på op til 4 ng mL−1 og kan ses med det blotte øje. Der var heller ingen elementer af krydsreaktivitet med nogle få af de andre proteinbiomarkører for Plasmodium. Når Immunokromatografisk analyse ved lateralt flow oprettet en med et ark nitrocellulosemembran, der blev brugt til testning, gav pålidelige og nøjagtige resultater sammenlignet med de eksisterende LFIA'er til PfHRP2-detektion. Ydermere kan den udføre malariadetektionstest, og andre proteinbiomarkører kan også testes.
Der er et par principper, som Lateral flow immochrmotograhy assay arbejder. For det første er arbejdsteknikkerne de samme som for ELISA -sandwich -teknikken, men forskellen ligger i den proces, hvor den kapillære virkning af immunologisk reaktion sættes gennem det kromatografiske papir. For det andet, når matrixen af prøven tabes på prøvepuden på LFIA-enheden, dannes et kompleks kendt som immunkomplekset (Ab-Ag-kompleks) på grund af antigenerne på prøvepuden med antistoffet. Dette immunkompleks bevæger sig derefter videre mod de andre dele af LFIA -enheden og kommer i kontakt med antistofferne låst på enhedens nitrocellulosemembran. Når der dannes flere komplekser, begynder den lilla-røde linje at vise, der angiver det positive resultat, dvs. det målrettede antigen er til stede i prøven. Den immunkromatografiske enhed oprettes ved at fastgøre prøvepuden til enden af membranen.
Fire trin er nødvendige for at lave en Immunkromatografisk test på LFIA -enheden. Det første trin er at lægge prøven på prøvepuden. Efter at prøven har været gennem prøvepuden, begynder solubiliseringen af molekylerne at forekomme. Her er solubilisering af detektormolekylet vigtig, da det for beskyttelsen af de positive resultater, de vil binde med målanalyt i prøven. Efter disse trin starter kapillærhandlingen, at den virker. Hele væskeblandingen føres til nitrocellulosemembranen ved hjælp af kapillærvirkning. Nu i nitrocellulosemembranen ville der være det immobiliserede antigen eller antistof, som yderligere vil kombinere med målanalytten og dermed bringe positive resultater, hvis de ville være til stede i prøven. Hvis resultatet er positivt, vises enten en lyserød eller lilla linje. Den adsorberende pude i enden absorberer eventuelle ekstra uabsorberede dele af prøven.
For at opsummere fordelene ved Immunokromatografisk analyse ved lateralt flow, det er pålideligt, hurtigt, præcist og let at bruge. Desuden er det omkostningseffektivt og kan bruges til forskellige diagnostiske formål. Der er ingen begrænsninger og hindringer for de klimatiske ændringer og forbehold for forskellige klimaer. Det er kun til engangsbrug og dermed hygiejniske og sikre tests. De er også let tilgængelige i håndkøb, og man behøver ikke at få en recept på det, dvs. tidsbesparende. Endelig kræver det en meget lille mængde prøvevolumen for at gennemgå testproceduren. Med fordele er der også få begrænsninger for det. For det første har det en tendens til kvalitetsresultater frem for de kvantitative resultater yderligere. Endelig er den ikke så følsom som andre enheder, fordi den kan registrere to analytter samtidigt.
Der er brede anvendelser af Lateral flow Immunkromatografisk assay. Det bruges til flere formål ved den kliniske diagnose til screening og påvisning af de forskellige kliniske markører. Desuden bruges den også til hjemmebaseret test og påvisning af forskellige slags sygdomme, såsom seksuelt overførte sygdomme, malaria, TB, leversygdomme og reproduktiv sundhed af begge køn kan også testes. Human choriongonadotropin (HCG) eller graviditetstest kan også påvises ved hjælp af Lateral FLow immunochromatographic Assay. LFIA er den mest foretrukne testmetode til påvisning af enhver form for virale, bakterielle eller endda parasitære infektioner såsom dengue, syfilis, filariasis osv. Det bruges også i videnskabelig retsmedicin og kræftbiomarkører.
Konklusion
Immunokromatografisk analyse ved lateralt flow er den mest foretrukne og nemme metode til at udføre enhver form for test. Den er teknologisk udstyret, nem at bruge, pålidelig og en effektiv metode. Der er nogle begrænsninger, der ikke vejer tungt i forhold til fordelene ved Lateral Flow Immunochromatographic Assay. De betragtes som moderne og konventionelle til detektion af test, og deres brede anvendelse beviser deres autenticitet og troværdighed. Derfor kan Lateral Flow Immunochromatographic Assays bruges til en bred vifte af formål relateret til enhver form for medicinsk test.
Referencer
https://www.onlinebiologynotes.com/immunochromatography-assay-ica-principle-components-steps-merits-limitations-and-applications/
https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2021/an/d0an02073g#!divAbstract
https://www.sciencedirect.com/topics/chemistry/immunochromatography