Lateral flow assay, en enhed eller strimler test, der bruges til at bestemme tilstedeværelsen eller fraværet af en analyt i prøven, har en mekanisme, der følges under hele testprocessen. Mekanismen sikrer, at testen fungerer, udfører proceduren og får resultaterne af testen. For at tilføje det faktum, skal det bemærkes, at selv teknologien har været overalt på det medicinske område og Lateral flow -assays er ikke adskilt fra det. Derfor er teknologien blevet inkorporeret i Lateral flow -analyse men deres arbejde eller mekanisme forbliver den samme. Og dette er en af grundene til, at det er den øverste testenhed for udviklede og udviklingslande.
For at forstå mekanismen for Lateral flow -analyse, her er en kort oversigt over dens mekanisme. Først og fremmest er der en prøvepude, som prøven er lagt på, og som videre bevæger sig til den konjugerede pude. På den konjugerede pude opstår bindingshændelserne på grund af tilstedeværelsen af detektionspartikler, der enten kan være guld eller latex. Det næste trin, der opstår, er, at prøven og reaktionsmidlet binder og bevæger sig til reaktionsmembranen. Reaktionsmembranen hjælper med at producere resultater. Testlinjen stopper enten eller fortsætter med at flyde indtil den adsorberende pude. For at vide, om Lateral Flow Assay fungerede, reagerer agenserne ved kontrollinjen og producerer resultaterne. Den detaljerede mekanisme for Lateral Flow Assay beskrives derefter.
Prøvepude er starten på den laterale flowassaytest. Sammensætningen af prøvepåføringspuden er glasfiber, vævet net eller cellulose. Glasfiber, vævet net og cellulose ejer forskellige egenskaber fra hinanden. Funktionen og omkostningerne ved dem afhænger også af typen. Grundlæggende starter prøvepåføringspladen Lateral Flow Assay -testen, og hovedfunktionen er at få en lige mængde af prøven eller prøven og distribuere den. Det er vigtigt for prøvepuden at tillade udjævning af prøven, så den kan foretage adskillelse af prøven, pH -justering og binding ensartet. For at testen kan startes, skal prøven sættes på prøvepåføringsblokken.
Den konjugerede pude er det andet trin i Lateral Flow Assay's mekanisme. Conjugate Release Pad består af ikke-vævet glasfiber, og der ligger detektionsmidlet, der allerede er tørret op. At forbinde den med prøvepåføringspuden, når prøven når mætningspunktet og strømmer til den konjugerede frigivelsespude, og her frigives detektionsmidlet for at analysere prøven. Konjugatpudens hovedfunktion er at sikre, at prøven og reaktionsmidlet flyttes til membranen, samtidig med at konjugatet bevares. I den konjugerede pude skal der være lav uspecifik binding for at sikre, at detektionsreagenset ikke sidder fast i puden.
Der er altid påvisningsreagens i lateral flow assay test. Detektionsreagenset har antistoffer, der yderligere er konjugeret med fluorescerende eller de farvede partikler. Effektiviteten af det laterale flowassay er afhængig af kvaliteten af antistofferne og detektionsreagenset.
Udvælgelsen af antistoffet til lateral flow assay -testen betragtes som vigtig, og få faktorer skal tages i betragtning, når antistoffet vælges til det laterale flow -assay. Den første faktor er at have en bedre forsyning af antistoffet. For det andet skal antigens specificitet kontrolleres og sikres. Også valget mellem monoklonale eller polyklonale, når man vælger antistoffer. Monoklonaler anbefales, fordi der kan være produktion af et stort antal antistoffer og dermed hjælper med at identificere den enkelte antigene epitop, hvorimod Polycilonals kan blive genstand for variabilitetsfaktoren, og deres levering heller ikke er garanteret.
Substratmembran eller nitcocellulosemembran er en af de vigtigste og afgørende faktorer ved bestemmelse af lateralflowanalysen og også over for dens følsomhed. Testlinjen og kontrollinjen trækkes over membranen for at give god binding til at fange antistofferne. Ikke-specifik adsorption på testlinjerne og kontrollinjerne kan påvirke følsomheden af resultaterne, der kan give falske resultater.
En adsorberende pude eller vægeunderlag er placeret ved enden af strimlen eller sidestrømsanalyseanordningen. Sugepositionens målposition kan have et cellulosefilter, der hjælper med at optimere mængden af prøven i teststrimlen. Hovedfunktionen for den adsorberende pude er at kontrollere strømmen af prøvevæske over nitrocellulosemembranen. Ikke kun det, men det stopper også prøvens tilbagestrømning og bevarer dermed den tilstrækkelige mængde af prøven eller prøven.
Selvom trin-for-trin-handlingen eller mekanismen er blevet forklaret meget detaljeret, er procesmulighederne i det laterale flowassay afgørende for det. Der er to procesmuligheder; den ene er batchbehandling, og den anden er in-line/rulle-til-rulle samling. Batchbehandling er ost-effektiv og har brug for personale, som kan føre til variation i resultaterne og dermed producere upålidelige resultater. Mens spole-til-hjul-samling er en maskinforarbejdet behandlingsmulighed og mere pålidelig for større eller store mængder. Under begge former for behandlingsmuligheder er temperaturaspektet meget vigtigt og må overvejes at give sande og ønskelige resultater.
Mekanisme for lateral flow -analyse består af få dele, der inkluderer puder, membraner og nogle partikler, der hjælper med at opdage prøven og producere resultater. Selvom der er forskellige Lateral Flow Assay -enheder, og nogle af dem er teknologisk inkorporeret, mens nogle ikke er det, men mekanismen forbliver den samme. Alle faktorer i mekanismen for Lateral Flow Assay må betragtes som vigtige og bør aldrig overses.
Referencer
https://www.creative-diagnostics.com/Immunochromatography-guide.htm
https://fnkprddata.blob.core.windows.net/domestic/download/pdf/IBS_A_guide_to_lateral_flow_immunoassays.pdf
https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/lateral-flow-test
